МЕХАНІЗМИ ІНТОКСИКАЦІЙ

УДК 613.6+615.9+612.017.1+577.1:001.5

Л.М. Краснокутская, В.А. Стежка, Л.А. Легкоступ, И.Н. Андрусишина, Е.Г. Лампека

ОСОБЕННОСТИ ВОЗРАСТНЫХ РЕАКЦИЙ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НИЗКИХ ДОЗ СОЕДИНЕНИЙ РТУТИ, СВИНЦА И МАРГАНЦА

Институт медицины труда АМН Украины, г. Киев

Актуальность проблемы. В предыдущих наших публикациях мы неоднократно акцентировали внимание исследователей на важности для теории и практики медицины труда проблемы исследования влияния на организм человека и экспериментальных животных химических факторов малой интенсивности, в частности соединений тяжелых металлов [7, 16, 19—22]. Такие исследования важны для оценки опасности (в том числе потенциальной) этих соединений по проявлению их токсичности в отношении отдельных систем организма, соотнесения и разграничения выявленных сдвигов в состоянии гомеостаза к вариабельной (относительной) норме, состоянию адаптации, предпатологии или начальным проявлениям патологического процесса. Особенности адаптации организма к воздействию химических соединений малой интенсивности необходимо исследовать, ориентируясь не на отдельные показатели его жизнедеятельности (функциональные, биохимические, иммунологические, морфологические и др.), а на определенную группу показателей, характеризующих его организованную системную функцию [3, 7, 12, 15, 19, 21, 22]. Важнейшее место в познании особенностей последствий взаимодействия организма с экзогенно поступающими в него соединениями тяжелых металлов должны занимать исследования по установлению механизма этого процесса [7, 9—16, 19, 21]. Учитывая степень реально существующего в настоящее время загрязнения окружающей среды соединениями тяжелых металлов, их способность к материальной и функциональной кумуляции, особую актуальность приобретают исследования по установлению особенностей реагирования организама на их воздействие в возрастном аспекте.

Цель работы — сравнительное исследование механизма влияния низких доз (1/100—1/300 LD50) хлоридов ртути, марганца и ацетата свинца на функциональное состояние нейтрофильных лейкоцитов периферической крови молодых и старых крыс, определяющих одну из важнейших системных функций организма — состояние его неспецифической резистентности, а также на активность некоторых гуморальных факторов регуляции данной функции нейтрофилов — опсонизирующие свойства сыворотки крови.

Материалы и методы исследований

Исследования проведены на белых крысах-самцах двух возрастных групп: молодые животные с исходной массой тела 134—140 г и старые с массой тела 240—300 г. Фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) в периферической крови, а также опсонизирущие свойства сыворотки крови исследовали в динамике длительного ежедневного внутрибрюшинного введения ацетата свинца, хлорида ртути(II) в дозе 1/300 LD50 и хлорида марганца (II) в дозе 1/100 LD50. Исследуемые показатели регистрировали у животных после 10, 30, 45 и 60 введений указанных химических соединений. В соответствующих контрольных группах использовано по 12—14, а в опытных — по 5—6 животных. ФАН в периферической крови крыс оценивали по показателям фагоцитарного индекса (ФИ) — процент нейтрофилов, принимающих участие в фагоцитозе, и фагоцитарного числа (ФЧ) — среднее число тест-обьектов, поглощенных одним нейтрофилом. Активность гуморальных факторов сыворотки крови, оказывающих регулирующее влияние на фагоцитоз, в частности ее опсонизирующих свойств, устанавливали по влиянию на ФАН интактных крыс (по показателям ФИ и ФЧ) сыворотки крови контрольных и опытных животных. В качестве объекта фагоцитоза использовали суточную убитую нагреванием при 56°С культуру E. coli [4]. Результаты исследований обработаны статистически с определением t-критерия Стьюдента.

Результаты исследований и их обсуждение

Результаты исследования ФАН периферической крови и опсонизирующей активности сыворотки крови у крыс после внутрибрюшинного введения хлорида ртути представлены в табл. 1. Из них следует, что молодые и старые животные в контрольных группах по этим показателям не различались. В динамике эксперимента после 10-ти и 60-ти введений соли ртути в периферической крови молодых животных существенного изменения относительного содержания активно участвующих в фагоцитозе нейтрофилов не наблюдалось. Однако поглотительная активность фагоцитов после 10-ти введений по сравнению с контролем достоверно возрастала, а после 60-ти, наоборот, снижалась. У старых животных после 45-ти введений соли ртути относительное содержание нейтрофилов, принимающих участие в фагоцитозе, достоверно увеличивалось. При этом оно не отличалось от такового у молодых крыс в данный срок опыта. После 60-ти введений старым животным хлорида ртути (ii) относительное количество активных фагоцитов в периферической крови снижалось как по сравнению с таковым в контрольной группе старых животных, так и у молодых крыс. В этот же срок эксперимента у старых животных наблюдалось снижение поглотительной способности нейтрофилов периферической крови по сравнению с таковой у соответствующих контрольных крыс.

Следовательно, многократное введение животным хлорида ртути (II) в дозе 1/300 LD50 сопровождалось несколько различными эффектами на ФАН периферической крови в зависимости от их возраста. В частности, его введение молодым крысам не влияло на относительное содержание в периферической крови нейтрофилов, принимающих участие в фагоцитозе, однако вызывало фазное изменение (увеличение после 10-ти введений и снижение после 60-ти введений) их поглотительной способности. У старых крыс наблюдалось увеличение относительного содержания активных фагоцитов после 45-ти введений хлорида ртути (II) с последующим его снижением после 60-ти введений. Последнее сочеталось и со снижением их поглотительной способности. Приведенные данные свидетельствуют о том, что нейтрофилы периферической крови старых крыс по сравнению с молодыми животными более чувствительны к влиянию катионов ртути (II).

Известно, что в регуляции ФАН принимают участие многие, в первую очередь, гуморальные факторы — компоненты комплемента, иммуноглобулины, циркулирующие иммунные комплексы. Среди них ведущее место занимает комплекс биологически активных веществ, определяющий опсонизирующие свойства сыворотки крови [1—3, 8].

Из данных в табл. 1 следует, что возраст животных не оказывал влияния на опсонизирующую активность сыворотки крови у контрольных крыс. Введение молодым и старым животным соли ртути в динамике эксперимента не сопровождалось изменением содержания зависимого от опсонизирующей активности сыворотки крови относительного содержания активных фагоцитов. Однако зависящая от опсонинов поглотительная их активность снижалась после 45-ти и 60-ти введений у молодых крыс и после 60-ти введений у старых крыс. Следовательно, введение крысам хлорида ртути (II) в динамике эксперимента приводило к более быстрому снижению опсонизирующих свойств сыворотки крови у молодых животных. Результаты проведенных исследований по изучению влияния избытка катионов ртути на функциональное состояние нейтрофильных лейкоцитов периферической крови крыс свидетельствуют о том, что к данному воздействию более чувствительны клетки старых животных, тогда как у молодых раньше возникают нарушения в активности гуморальных регулирующих факторов.

Результаты исследования влияния ацетата свинца в дозе 1/300 LD50 на функциональное состояние нейтрофилов периферической крови крыс представлены в табл. 2. ФАН в контрольной группе старых животных была достоверно выше, чем у молодых, что, по всей вероятности, было связано с сезонными возрастными особенностями реактивности организма крыс, поскольку исследования были проведены в осенний период. В динамике эксперимента у молодых животных после 10-ти и 30-ти введений ацетата свинца наблюдалось снижение относительного числа активных фагоцитов и по сравнению с контролем, а после 45-ти и 60-ти введений, наоборот, его увеличение. Это сочеталось с фазными существенными (до 2 раз) колебаниями поглотительной способности фагоцитов: снижение против контроля после 30-ти введений ацетата свинца и увеличение после 10-ти, 45-ти и 60 введений. У старых животных в динамике ежедневного введения ацетата свинца также наблюдалось фазное изменение ФАН: снижение относительного числа активных фагоцитов в периферической крови после 10-ти введений и увеличение после 60-ти введений; снижение поглотительной способности нейтрофилов после 30-ти и 45-ти введений и увеличение после 60-ти введений.

Следовательно, ежедневное введение крысам ацетата свинца в дозе 1/300 LD50 вызывало независимое от их возраста фазное нарушение ФАН, которое характеризовалось первичным угнетением после 10-ти и 30-ти введений и вторичной стимуляцией после 45-ти и 60-ти введений. Следует отметить наличие несколько более резких нарушений функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов периферической крови у молодых животных по сравнению со старыми.

Опсонизирующие свойства сыворотки крови у молодых и старых контрольных животных не различались (табл. 2). В динамике эксперимента они фазно изменялись в обеих группах крыс. В частности, у молодых крыс наблюдалось их снижение по влиянию на количество активных фагоцитов в периферической крови после 30-ти введений ацетата свинца и увеличение после 60-ти введений. По влиянию на поглотительную способность нейтрофилов у молодых крыс выявлено только снижение опсонизирующих свойств сыворотки крови после 30-ти и 45-ти введений ацетата свинца. Следовательно, выявленные при прямом исследовании нарушения ФАН периферической крови (по показателям ФИ и ФЧ) в динамике введения молодым животным ацетата свинца были обусловлены изменением опсонизирующих свойств сыворотки крови (табл. 2). У старых животных в динамике эксперимента также наблюдалось фазное изменение опсонизирующих свойств сыворотки крови по влиянию на количество активных фагоцитов в периферической крови — увеличение после 10-ти введений и снижение после 30-ти введений, а также по влиянию на их поглотительную способность — увеличение после 10-ти введений и снижение после 30-ти и 45-ти введений. Следовательно, и у старых животных выявленные нарушения ФАН периферической крови были обусловлены изменением опсонизирующих свойств крови. Следует особо отметить, что снижение опсонизирующих свойств сыворотки крови крыс в обеих возрастных группах в динамике введения ацетата свинца совпадало со снижением ФАН периферической крови по показателям ФИ и ФЧ, а их увеличение совпадало с активацией ФАН только у молодых крыс после 60-ти введений. Последнее, вероятно, свидетельствует о большей значимости гуморальных факторов в регуляции ФАН периферической крови у молодых крыс, чем у старых.

Результаты исследования влияния хлорида марганца (II) в дозе 1/100 LD50 на функциональное состояние нейтрофилов периферической крови крыс представлены в табл. 3. У молодых контрольных животных ФАН была выше, поскольку в их периферической крови относительное содержание активных фагоцитов составило 84,1% против 80,6% у старых (p<0,05), а их поглотительная способность характеризовалась тенденцией к увеличению. В динамике эксперимента после введения хлорида марганца (ii) у животных обеих групп развивались практически идентичные нарушения ФАН, но в несколько иные сроки. В частности, после 10-ти введений у молодых и после 30-ти введений у старых крыс увеличивалось, а после 60-ти введений в обеих группах уменьшалось относительное содержание в периферической крови активных фагоцитов по сравнению с соответствующими контролями (p<0,05). Аналогично этому изменялась и поглотительная способность нейтрофилов: увеличивалась в обеих группах животных после 10-ти введений хлорида марганца (ii) и уменьшалась после 60-ти введений (p<0,05). Следует отметить, что у старых животных наблюдалось снижение поглотительной способности нейтрофилов и после 45-ти введений хлорида марганца (ii). Следовательно, в динамике эксперимента для хлорида марганца (ii) также характерно фазное изменение ФАН периферической крови и их поглотительной способности: вначале — активация, затем — угнетение. При этом более выраженное нарушение ФАН и их поглотительной способности под влиянием хлорида марганца (ii) отмечалось у старых животных по сравнению с молодыми (табл. 3).

Опсонизирующая способность сыворотки крови в контрольных группах молодых и старых крыс не различалась (табл. 3). При многократном введении соли марганца в обеих группах животных выявлено однотипное, однако несколько различающееся во времени развития, фазное изменение данного показателя. В частности, опсонизирующая способность сыворотки крови в отношении влияния на ФАН увеличивалась у молодых животных после 10-ти и 30-ти введений, а у старых — только после 30-ти введений. У молодых животных она снижалась после 60-ти введений, а у старых — после 45-ти и 60-ти введений. Опсонизирующая способность сыворотки в отношении влияния на поглотительные свойства нейтрофилов изменялась в обеих группах животных однотипно: наблюдалось увеличение поглотительных свойств нейтрофилов после 10-ти введений и снижение после 45-ти и 60-ти введений. Следовательно, увеличение опсонизирующих свойств сыворотки крови по отношению к влиянию на число активных фагоцитов в периферической крови у молодых крыс развивается несколько раньше (после 10-ти введений хлорида марганца), чем у старых животных (после 30-ти введений), тогда как по отношению к влиянию на поглотительную способность нейтрофилов у животных обеих групп по времени развития и направленности не различалась. Выявленные нарушения функционального состояния нейтрофилов по их фагоцитарной активности (ФИ, ФЧ) в динамике введения животным обеих групп хлорида марганца совпадали по срокам развития и направленности изменениям опсонизирующей способности сыворотки крови. Это может свидетельствовать, с нашей точки зрения, в пользу ведущей роли нарушений гуморальной регуляции ФАН в реализации влияния хлорида марганца (II) на функциональное состояние нейтрофильных лейкоцитов периферической крови при меньшем значении прямых эффектов катионов марганца на эти клетки.

При сравнительном исследовании особенностей влияния низких доз солей трех тяжелых металлов — хлорида ртути (1/300 LD50), хлорида марганца (1/100 LD50) и ацетата свинца (1/300LD50) на функциональное состояние нейтрофильных лейкоцитов периферической крови молодых и старых крыс установлено, что наоболее существенные нарушения в одной из важнейших системных функций организма — состоянии его неспецифической резистентности в обеих группах животных вызывала соль свинца, меньшие — соль марганца и наименьшие — соль ртути (табл. 1—3). Это несколько отличается от данных [21], согласно которым резерв первичной адаптации у крыс к однократным введениям относительно больших доз (1/2—1/70 LD50) данных солей, выраженный в процентах от LD50, снижался в ряду: соль марганца (12,5%) > соль свинца (6,2%) > соль ртути (3,1%), то есть, наименьшим был по отношению к хлориду ртути (II). Последнее, с точки зрения авторов, являлось одним из важных показателей степени опасности химического вещества.

В наших исследованиях хлорид ртути (II) в динамике эксперимента не вызывал у молодых крыс изменения относительного количества нейтрофилов в периферической крови, принимающих участие в акте фагоцитоза, и только влиял на их поглотительную способность — усиливал после 10-ти введений и снижал после 60-ти. В группе старых животных наблюдался резкий переход от первичного увеличения относительного количества активных фагоцитов (после 45-ти введений) до его снижения после 60-ти введений. При этом их поглотительная активность снижалась после 60-ти введений (табл. 1). В обеих группах животных наблюдалось только снижение опсонизирующих свойств сыворотки крови, которое проявлялось в уменьшении поглотительной способности нейтрофилов, и не влияло на количество активных фагоцитов. Следовательно, нейтрофилы периферической крови старых крыс более чувствительны к прямому влиянию катионов ртути, чем молодых. В обеих группах животных они чувствительны к снижению активности одного из ведущих гуморальных факторов регуляции функции фагоцитоза — опсонизирующих свойств сыворотки крови, что сопровождается уменьшением их поглотительных свойств.

В группах молодых и старых животных, которым вводили ацетат свинца, наблюдались четкие фазные изменения фагоцитоза по количеству активных фагоцитов в периферической крови (ФИ): начальная фаза угнетения сменялась фазой активации. При этом у молодых животных наблюдался более резкий переход от фазы угнетения (после 10-ти и 30-ти введений) к фазей активации (после 45-ти и 60-ти введений). Тогда как у старых животных эти фазы были более сглаженными — угнетение после 10-ти введений и активация после 60-ти введений. Кроме этого, у молодых животных наблюдалась отчетливая синхронизация фаз изменения относительного количества активных фагоцитов с изменением их поглотительной активности, а для старых животных это было менее характерным (табл. 2). Вызванные ацетатом свинца изменения опсонизирующих свойств сыворотки крови у молодых животных проявлялись по влиянию на относительное количество активных фагоцитов в периферической крови крыс только в фазе стимуляции, а по влиянию на поглотительную способность нейтрофилов носили дискордантный характер и на фазу ее стимуляции не оказывали влияния. У старых животных изменение опсонизирующих свойств сыворотки крови не проявлялось на относительном количестве активных фагоцитов в периферической крови и реализовалось только в фазу снижения поглотительной способности нейтрофилов. Следовательно, нейтрофилы молодых животных более чувствительны к влиянию ацетата свинца, чем старых животных.

В эксперименте с введением крысам относительно большей по токсичности дозы хлорида марганца (1/100 LD50), чем хлорида ртути и ацетата свинца (1/300 LD50), также выявлялась отчетливая фазность нарушений функционального состояния нейтрофилов периферической крови (табл. 3). Первая фаза стимуляции ФАН развивалась раньше у молодых (после 10-ти введений) по сравнению со старыми животными (после 30-ти введений), а фаза угнетения развивалась в обеих группах синхронно — после 60-ти введений. Обе фазы нарушения функционального состояния нейтрофилов периферической крови у крыс в динамике эксперимента также синхронизировались с направленностью изменения опсонизирующих свойств сыворотки крови. Следовательно, нейтрофильные лейкоциты периферической крови молодых животных более чувствительны к влиянию катионов марганца, чем старых. В то же время, нейтрофилы старых животных более чувствительны к угнетающим гуморальным влияниям, а молодых — к активирующим.

Закономерно возникает вопрос, в какой мере выявленные особенности возрастных реакций нейтрофильных лейкоцитов периферической крови крыс связаны с концентрацией в ней катионов ртути, свинца и марганца после внутрибрюшинного введения соответствующих солей тяжелых металлов. Правомерность данного вопроса обусловлена тем, что разным возрастным периодам жизни животных присущи определенные особенности распределения, скорости и уровня накопления химических веществ в организме, а также морфофункциональные и биохимические особенности, определяющие возрастную чувствительность к ядам [17]. В наших исследованиях в динамике эксперимента после внутрибрюшинного введения изотоксических доз хлорида ртути (II) и ацетата свинца (1/300 LD50) в крови молодых крыс наблюдалось более существенное увеличение содержания катионов ртути (на 54%, 23% и в 2 раза, соответственно после 30-ти, 45-ти и 60-ти введений), чем у старых животных, а катионов свинца, наоборот, на 18—25% больше у старых, чем у молодых. При этом, более чувствительными к катионам ртути были нейтрофилы старых, а к катионам свинца — молодых крыс. Следовательно, в обеих группах животных нарушения ФАН и изменение опсонизирующих свойств сыворотки крови в большей мере проявлялись при более низких концентрациях катионов тяжелых металлов в крови.

Известно, что акт поглощения частиц, содержащих генетически чужеродный биологический материал, относится к проявлениям специализированной функции цитоплазматической мембраны фагоцитов [1, 3, 5, 8]. Ранее нами было установлено нарушение данной функции цитоплазматической мембраны нейтрофилов периферической крови крыс под влиянием более высоких концентраций (1/50, 1/100 LD50) ацетата свинца, сульфата кадмия и хлорида марганца (II) в опытах in vivo при моделировании соответствующих интоксикаций и в опытах in vitro (катионы свинца и кадмия в концентрации 1х10-11—1x10-3 М) в краткосрочной смешанной культуре клеток периферической крови [8—12, 14]. В условиях in vivo наблюдалось связанное с воздействием катионов свинца фазное нарушение ФАН — от угнетения (после 5-ти внутрибрюшинных введений) до стимуляции (после 25-ти введений). Это сопровождалось угнетением внутриклеточных окислительно-восстановительных процессов и частичной потерей фагоцитами способности к реализации некоторых специализированных клеточных функций (респираторный взрыв, завершенный фагоцитоз, бактерицидная активность). По своей качественной характеристике выявленные нарушения ФАН были аналогичны таковым, установленным нами в данной работе при использовании более низкой дозы ацетата свинца (1/300 LD50). Следует обратить внимание и на тот факт, что применение в ранее проведенных нами исследованиях в опытах in vitro значительно более низких доз солей свинца и кадмия (в 1000—100000 раз меньше естественной экспозиционной дозы для контрольных крыс) также вызывало отчетливое фазное нарушение специализированной функции цитоплазматической мембраны нейтрофилов периферической крови по изменению их фагоцитарной активности. Аналогичные нарушения данной функции в опытах in vivo и in vitro установлены нами и в популяциях и субпопуляциях лимфоцитов периферической крови крыс, а также у людей, экспонированных соединениями тяжелых металлов, при проведении производственных исследований [10—12, 15]. Следовательно, можно полагать, что феномен нарушения специализированной функции цитоплазматической мембраны лежит в основе механизма взаимодействия катионов тяжелых металлов с иммунокомпетентными клетками и реализации их иммунотоксического действия. С другой стороны, отчетливое проявление данного эффекта катионов тяжелых металлов в широком диапазоне доз — от очень низких (1x10-11 М) в опытах in vitro до достаточно высоких (1/300—1/100—1/50 LD50) в опытах in vivo является весомым аргументом в пользу возможной безпороговости их биологического действия, в частности свинца.

Проведенными исследованиями выявлены нарушения функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов периферической крови крыс, обусловленные как прямым влиянием катионов тяжелых металлов на цитоплазматическую мембрану, приводящего к нарушению ее специализированной функции, так и опосредованным изменением активности гуморальных факторов, принимающих участие в регуляции фагоцитоза, в частности, опсонизирующих свойств сыворотки крови. Определенная часть выявленных нарушений была связана с возрастными особенностями реакции нейтрофилов периферической крови крыс на поступающие в их организм низкие дозы (1/100—1/300 LD50) солей ртути, свинца и марганца. В частности, нейтрофильные лейкоциты молодых животных менее чувствительны к прямому влиянию катионов ртути, более чувствительны к влиянию катионов свинца и марганца, а также более чувствительны к стимулирующим гуморальным влияниям на ФАН при введении хлорида марганца (II) и ацетата свинца. Нейтрофилы старых животных более чувствительны к прямому влиянию на ФАН катионов ртути, менее чувствительны к влиянию катионов свинца и марганца. Кроме того, они менее чувствительны к снижающим поглотительную способность гуморальным влияниям при введении ацетата свинца и более чувствительны к угнетающим гуморальным влияниям при введении хлорида марганца (П). Нейтрофилы обеих групп животных чувствительны к снижению опсонизирующих свойств сыворотки крови, наступающих после введения хлорида ртути (II), что приводит к снижению их поглотительных свойств.

Литература
1. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. —К.: Наукова думка, 1988. —189 с.
2. Бутенко Г.М., Терешина О.П. Функциональная активность системы мононуклуарных фагоцитов — влияние возраста и иммунных комплексов // Иммунология. —1992. —№3. —С. 15—17.
3. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. Одесса: Астро принт, 1999. —604 с.
4. Иммунология: Практикум / Е.У. Пастер, В.В. Овод, В.К. Позур, Н.Е. Вихоть. —Киев: Вища шк. Из-во при Киев. ун-те, 1989. —304 с.
5. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт. Междисциплинарный подход / Пер. с англ. —М.: Мир, 1980. —341 с.
6. Кундиев Ю.И., Тычинин В.А., Трахтенберг И.М., Попович М.И. Адаптационные и компенсаторные реакции при воздействии на организм экзогенных химических соединений // Curier medical. —1996. —№5. —C. 41—48.
7. Кундиев Ю.И., Стежка В.А., Дмитруха Н.Н. и др. Экспериментальное исследование зависимости изменения иммунных и биохимических механизмов поддержания гомеостаза от особенностей и выраженности материальной кумуляции свинца в организме // Мед. труда и пром. экология. —2001. —№4. —С. 327—338.
8. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. —Новосибирск: Наука, 1983. —254 с.
9. Стежка В.А. Імунотоксична дія важких металів // Матер. II Конгресу патофізіологів України. —К., 1996. —С. 52.
10. Стежка В.А., Михайлова В.В., Чередниченко В.М. Состояние иммунной системы при воздействии соединений свинца // Актуальные проблемы гигиены, физиологии труда и профпатологии в промышленности. —Кривой Рог, 1995. —С. 29.
11. Стежка В.А., Оникиенко Ф.А., Блакита И.В., Михайлова В.В. К вопросу о биологических маркерах экспозиции и биологических эффектов свинца на организм человека // Там же. —С. 30.
12. Стежка В.А., Дмитруха Н.Н., Покровская Т.Н. и др. Сравнительная оценка иммунотоксического действия свинца на нейтрофильные лейкоциты и лимфоциты периферической крови крыс в опытах in vivo и in vitro // Проблемы медицины труда. —К., 1998. —С. 149—159.
13. Стежка В.А., Дмитруха Н.М., Покровська Т.М. та ін. Критерії імунотоксичності важких металів, методи скрінінгового дослідження потенційної токсичної та імунотоксичної дії ксенобіотиків in vitro // Фізіологічний журнал. —2000. —Т. 46, №2. —С. 65—66.  14. Стежка В.А., Лампека Е.Г., Дмитруха Н.Н. К механизму материальной кумуляции тяжелых металлов в организме белых крыс // Гиг. труда. —2001. —Вып. 32. —С. 219—230.
15. Стежка В.А., Дмитруха Н.Н., Покровская Т.Н. и др. Сравнительное исследование токсического влияния кадмия на нейтрофилы и лимфоциты периферической крови крыс в опытах in vivo и in vitro // Там же. —С. 245—256.
16. Стежка В.А., Дмитруха Н.Н., Покровская Т.Н. и др. Влияние соединений тяжелых металлов из окружающей среды на состояние иммунной системы у механизаторов сельского хозяйства // Довкілля та здоров'я. —2002. —№1. —С. 6—12.
17. Тимофеев В.П., Семенова В. В. Возрастной аспект в токсиколого-гигиенических исследованиях (обзор) // Гиг. и сан. —1993. —№7. —С. 68—72.
18. Трахтенберг И.М., Тимофиевская Л.А., Квятковская И.Я. Методы изучения хронического действия химических и биологических загрязнителей// Рига: Зинатне, 1987. —С. 73.
19. Трахтенберг И.М., Тычинин В.А., Кустов В.В. Экзогенные химические факторы малой интенсивности и адаптация // Функциональные резервы и адаптация. Матер. всес. конф. —К., 1990. —С. 119—122.
20. Трахтенберг И.М., Сова Р.Е., Шефтель В.О., Оникиенко Ф.А. Проблема нормы в токсикологии. —М.: Медицина, 1991. —206 с.
21. Трахтенберг И.М., Тычинин В.А. Дискуссионные вопросы о критериях нормы, адаптации, предпатологии и патологии при воздействии на организм экзогенных химических веществ // Проблемы медицины труда. —К., 1998. —С. 44—51.
22. Тычинин В.А. Некоторые вопросы методологии обоснования предельно допустимых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны // Гиг. труда и проф. заб. —1986. —№10. —С. 5—10.


| Зміст |