УДК 547.391.1:615.9:616-08-039.71

В.Д. Лукьянчук, д.м.н., В.Н. Радионов

АКРИЛАТЫ: ТОКСИКОЛОГИЯ, ТЕРАПИЯ И ПРОФИЛАКТИКА ОТРАВЛЕНИЙ (обзор литературы)

Луганский государственный медицинский университет, Украина

В связи с ростом химического производства особую актуальность приобретает проблема лечения и предупреждения патологических состояний, обусловленых действием на организм ксенобиотиков различной химической природы. В настоящее время среди органических соединений, наиболее широко используемых в промышленности, важное место занимает акриловая кислота (АК) и её производные, в частности алифатический нитрил — акрилонитрил (АН) и акриламид (АА), промышленный синтез которых в Украине ежегодно возрастает, в том числе и в Донбасском регионе [1—5].

АК используется для синтеза акриловых и метакриловых полимеров и сополимеров, которые широко применяются в текстильной промышленности и производстве волокон для пропитки тканей из натуральных и синтетических волокон с целью придания им желаемой мягкости или жесткости, абразивостойкости. В кожевенной промышленности акриловые полимеры используют в качестве грунтового слоя для отделки кож. В целлюлозно-бумажной промышленности акриловыми эмульсиями пропитывают и покрывают бумагу, в результате чего повышаются ее влагостойкость, сопротивление разрыву, жиростойкость [5].

В последнее время все более широкое применение в различных областях техники находят полимерные оптические волокна (ПОВ). Наиболее перспективными материалами для изготовления ПОВ, предназначенных для связи на короткие и средние расстояния, являются полиакрилаты [5].

Кроме того, АК применяется в производстве полиакриловой кислоты, ионообменных смол, каучуков, эфиров, бутил-, трет-бутил, изобутил-, метил- и этилакрилатов, этиленгликольмоноакрилатов [5].

АН преимущественно используется как сырьё для производства синтетических каучуков, полимеров, полиакрилового волокна, а также как полупродукт в синтезе акриламида, оргстекла, растворителей, эмульгаторов, в производстве красителей, аналитических реагентов, изделий, контактирующих с пищевыми продуктами (клеи, целлофан, эластомеры, винилпластовые покрытия), в качестве растворителя для осадочных ванн при производстве вискозы и синтеза многоугольных кислот [6—8].

В сельском хозяйстве АН применяют как эффективное средство для протравливания зерна, а в смеси с четыреххлористым углеродом — в качестве фумиганта для обработки табака, мукомольного и хлебопекарного оборудования, в виде деревозащитного средства, для улучшения структуры почв [8, 9].

АА широко используется в производстве высокоэффективного флокулянта полиакриламида, нашедшего широкое применение в химической, горнорудной, нефтяной, целлюлозно-бумажной, текстильной и других отраслях промышленности [2]. Акриламидные полимеры часто используются в зубопротезировании, биологических и медицинских исследованиях, для электрофореза и иммобилизации ферментов на полиакриламидной основе [10]. В США АА нашел применение как средство для цементирования фундамента плотин и тоннелей, канализационных систем [2, 10—13].

АК (СН₂=СНСООН) — бесцветная жидкость с резким запахом, растворяется в воде, спирте, хлороформе, бензоле.

Это соединение обладает химическими свойствами, присущими карбоновым кислотам и этиленовым углеводородам. Присоединение протонных кислот, воды и NH₃ происходит против правила Марковникова с образованием b-замещенных производных. При УФ-облучении или в кислых водных растворах (рН=1,0) АК образует полиакриловую кислоту [13].

АА (CH₂=СНСОNН₂) — белое твердое кристаллическое вещество без запаха, хорошо растворимое в воде, этаноле, ацетоне, хуже в этилацетате, метаноле, хлороформе, бензоле. Вступает в реакцию с участием амидной группы или двойной связи. Характерными для АА являются реакции Дильса-Альдера, полимеризации и присоединения нуклеофильных реагентов по конъюгированной этиленовой связи. Это вещество стабильно в растворе при комнатной температуре и не подвергается спонтанной полимеризации. Кроме реакций карбамоилэтилирования и гидролиза до акриловой кислоты АА полимеризуется с образованием полиакриламида и сополимеризуется с акриловыми мономерами, стиролом, винилиденхлоридом и др. с образованием высокоструктурированного нерастворимого геля [2, 10, 11].

АН является одним из самых токсичных соединений среди нитрилов (органических цианидов). Его химические и токсические свойства в значительной степени определяются наличием в молекуле цианогруппы [3].

АН (СН₂=СНСN) — бесцветная, прозрачная, легко подвижная летучая жидкость со смешанным запахом хлороформа и синильной кислоты. В воде при 25°С растворяется 7,5% АН. С водой при неполном гидролизе в щелочной среде образует амид акриловой кислоты, при полном гидролизе — акриловую кислоту. При повышении температуры растворимость в воде сильно возрастает. Кроме того, АН растворяется в ацетоне, бензоле, четыреххлористом углероде, эфире, этаноле, метаноле, метилацетате, петролейном эфире, толуоле, ксилоле, керосине, хорошо растворяется в жирах [3, 4, 14].

АН легко воспламеняется, с воздухом при 3,05—17 об.% образует взрывоопасную смесь и легко полимеризуется со взрывом при нагревании в отсутствии кислорода под воздействием видимого света и щелочей [3].

Благодаря наличию нитрильного и винильного радикалов АН является активным химическим веществом: он легко полимеризуется, вступает в реакцию цианоэтилирования, в организме взаимодействует с глутатионом при каталитической активности глутатион-S-алкентрансфераз [15, 16]. В воде нестабилен. Через 6 сут в воде остается 3—5% от введенного количества яда [3, 4].

АК и её производные чаще всего поступают в окружающую среду при нарушениях технологии синтеза, правил техники безопасности, в аварийных ситуациях, при транспортировке, хранении и применении в различных отраслях народного хозяйства [2—5, 13].

Синтез акриловых мономеров и полимеров сопровождается большим количеством газовоздушных выбросов, содержащих в качестве примесей акриловые соединения, а также загрязнением сточных вод АК и её соединениями [5, 13], что обусловливает реальную опасность развития острых и хронических отравлений этими ксенобиотиками. Выбросы АК и её производных химическими предприятиями приводят к загрязнению атмосферного воздуха в районах расположения производств акрилатов ядовитыми химическими веществами в концентрациях, превышающих допустимые уровни, на расстоянии до 5 км и более [2—5].

По данным [5], в составе сбрасываемых в водоем сточных вод предприятиями по производству полиакрилатов обнаруживаются исходные продукты производства, основные акриловые мономеры и ряд промежуточных продуктов. Сточные воды акриловых производств по характеру загрязнения подразделяются на 3 типа: 1-й — содержащие высокие концентрации акрилатов, 2-й — умеренно загрязненные и 3-й — содержащие соли АК, преимущественно сульфаты.

Акриловые соединения обладают высокой токсичностью и в разных сочетаниях могут вызывать суммацию либо потенцирование токсических эффектов [13].

АА в основном поступает в окружающую среду со стоками промышленных предприятий, использующих или производящих полиакриламид [17, 18]. Другим источником загрязнения является поступление мономера АА из полиакриламидных флоккулянтов, применяемых в процессах отстаивания или модифицирования нефтяных хвостов для последующей очистки, а также осветления сточной и питьевой воды [14]. При этом при большинстве методов водоочистки АА не удаляется [17]. Локальное загрязнение также может возникнуть при использовании ксенобиотика для работ по цементированию фундаментов плотин и тоннелей [2]. Выбросы мономера АА в окружающую среду в процессе его производства и применения достигают 250 т в год [2].

Такое производное акриловой кислоты как АН поступает в окружающую среду в виде паров или из выходящих сточных вод [3, 4, 14, 19], сбрасываемых химическими предприятиями по производству латексов, акрилового волокна, акрилонитрильной и бутадиенстирольной смолы, АН, что может приводить к развитию острых и хронических интоксикаций у населения, проживающего вблизи таких производств [14].

В производственных помещениях значительно загрязняются АН оборудование, стены, окна, пол (до 0,0168 мг/см²), двери и ручки дверей, перила лестниц [20, 21], что обусловлено способностью АН быстро адсорбироваться на поверхность оборудования и одежды (суконных курток, сапог, ботинок, кожи) — до 0,0026 мг/см², и даже на внутреннюю поверхность противогаза [3, 4]. При этом удаление АН с текстильных и пищевых продуктов представляет большие технические трудности [8].

Суммарные выбросы АН в окружающую среду из промышленных источников составляют около 2% всей величины его производства [3].

При использовании полимерных материалов в пищевой промышленности в качестве упаковки некоторое количество АН может проникать в пищевые продукты вследствие длительного их хранения? достигая концентрации 0,005 мг/кг. Исследования, проведенные с различными растворителями, имитировавшими пищевые продукты, выявили значительную миграцию ксенобиотика из полимеров в 4% уксусную кислоту, 20% этанол, гептан и оливковое масло [23].

АК и её производные (АА и АН) отличаются весьма высокой токсичностью для лиц, контактирующих с ними как в условиях производства, так и применения в различных отраслях народного хозяйства [2—5, 10, 11, 13]. Эти ксенобиотики при интермиттирующем и непрерывном воздействии на человека и животных являются веществами высоко и чрезвычайно опасными в плане развития острой и хронической интоксикации [2—5].

Акрилаты хорошо всасываются при подкожном, энтеральном, ингаляционном путях введения, а также при накожной аппликации [2-5].

По данным [24], АК при поступлении через дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, перкутанно и при нанесении на слизистую оболочку глаз обладает местным (прижигающим, раздражающим) и общетоксическим действием. При острой ингаляционной интоксикации наряду с раздражающим действием отмечаются глубокие поражения ЦНС, проявляющиеся в виде нарушения координации движения и появлении клонических судорог конечностей [5]. При морфологических исследованиях погибших от ингаляционного воздействия АК животных отмечаются циркуляторные расстройства в виде полнокровия внутренних органов, отека легких, дистрофии почек и печени [24].

При ингаляционном поступлении в организм АК даже в концентрации 0,1—1,0 мг/м³ может вызывать у экспериментальных животных изменения показателей функционального состояния нервной системы, печени, окислительно-восстановительных процессов [5]. При этом установлено [5], что порог обонятельного ощущения для наиболее чувствительных лиц и порог рефлекторного изменения световой чувствительности глаза равны 0,2 мг/м³, а порог действия на электрическую активность коры головного мозга — 0,15 мг/м³.

У лиц, занятых в производстве акрилатов и полиакрилатов, отмечены эндокринно-гуморальные нарушения в организме [24, 25], АК вследствие своей липофильности накапливается в липидах биологических мембран, оказывая токсическое действие на организм. В экспериментальных условиях было установлено эмбриотоксическое и тератогенное действие АК при парентеральном введении в дозах 1/3, 1/5, 1/10 от ЛД₅₀ [24].

В литературе [26] имеются количественные данные о временной динамике органного распределения акрилатов. Наиболее высокие концентрации отмечаются в печени и почках. Наивысшее количество токсикантов в почках обнаруживалось уже через 2 ч и сохранялось в пределах 12 ч. Это наблюдение согласуется с данными о быстром удалении метаболитов с мочой [13].

АА оказывает местное (раздражение кожи и слизистых оболочек) и системное действия (поражение центральной, периферической и вегетативной нервной системы, почек и печени) при всасывании через кожу, ингаляционном воздействии и попадании per os [2, 10—12].

Локальное раздражение кожи и слизистых оболочек характеризуется образованием волдырей на ладонных и подошвенных поверхностях с последующим шелушением кожных покровов [27, 28], парестезиями, онемением кистей рук, стоп, голени и предплечья [28, 29]. Поражения центральной нервной системы АА проявляются повышенной утомляемостью, неустойчивостью при ходьбе и в положении стоя, нарушением памяти и головокружением [30]. Типичным признаком отравления АА является статическая атаксия, обусловленная поражением мозжечка [31], дегенерация чувствительных нервов, нистагм и невнятная речь [32]. При тяжелом отравлении отмечаются спутанность сознания, дезориентировка, нарушение памяти и галлюцинации [2]. АА вызывает дегенерацию волокон большого диаметра в периферических нервах, а также регенерирующих волокон. Аналогичное действие мономер оказывает на восходящие пути спинного мозга [12]. В связи с этим отмечается атрофия скелетной мускулатуры [10]. Периферическая невропатия может протекать со снижением, а в тяжелых случаях и потерей сухожильных рефлексов, угнетением вибрационной и других видов чувствительности, мышечной слабостью в дистальных отделах конечностей [27, 30].

В нервной системе накапливается менее 1% введенной дозы АА [12, 29], что свидетельствует об отсутствии избирательного сродства ксенобиотика к нервной ткани. После внутрижелудочного введения меченного по углероду мономера крысам линии Fisher в цельной крови через 1 ч находили 12% дозы, и это количество не изменялось в течение 70 ч. При этом больше всего АА обнаружено в мышцах и коже. За 1 сут с мочой выводится 62%, за 7 сут — 71% ксенобиотика [10, 11].

В исследованиях на животных выявлены ранние изменения вызванных потенциалов зрительного нерва, предшествующие клиническим признакам, а также изменения вызванных потенциалов сомато-сенсорных нервов [2]. Морфологически обнаружены дегенеративные изменения, главным образом аксонов периферических нервных волокон с менее выраженными изменениями более длинных волокон центральной нервной системы [11]. У животных с хронической интоксикацией наблюдается дегенерация клеток Пуркинье [2]. Эти изменения наиболее выражены в нервных окончаниях миелинизированных чувствительных нервных волокон периферической и центральной нервной системы, которые гипертрофируются и утолщаются вследствие накопления нейрофиламентов [10]. В чувствительных волокнах выявляются нарушения ретроградного и в меньшей степени антеградного транспорта в аксонах, подавление гликолиза и синтеза белка, причем последнее предшествует появлению клинических признаков [2, 11]. В нейронах мозжечка при АА-интоксикациях отмечается лизис тигроидного вещества[10].

Изучение распределения нейромедиаторов и связывания с рецепторами в головном мозге крыс выявило изменения связывания дофамина с дофаминовыми рецепторами в полосатом теле, которые соотносятся с поведенческими сдвигами, обусловленными воздействием АА [2, 10, 11].

АА-интоксикация сопровождается также поражением вегетативной нервной системы, затруднением мочеиспускания и акта дефекации [29], повышением потливости и покраснением дистальных отделов верхних и нижних конечностей [27, 30].

В 6-месячном эксперименте на белых крысах при введении дозы 0,1 мг/кг обнаружено уменьшение массы тела животных, увеличение суммационно-порогового показателя, снижение содержания в крови эритроцитов и гемоглобина, активности аланинаминотрансферазы (АЛТ), повышение активности аспартатаминотрансферазы (ACT), нарушение экскреторной функции печени. При дозе 0,01 мг/кг отмечены изменения активности АЛТ и ACT, а также увеличение суммационно-порогового показателя. Доза 0,005 мг/кг приводила к поражению нервной системы, включая нарушения условно-рефлекторной деятельности и исследовательской активности [11].

Что касается аллергенного действия АА, то имеющиеся в литературе данные противоречивы. Согласно [33, 34], сенсибилизирующий эффект не наблюдается при остром и хроническом отравлении. Доза 0,1 мг/кг вызывала увеличение количества бляшкообразующих клеток, а 0,01 мг/кг — такого действия не оказывала [34]. Попадая в организм человека, АА легко образует нерастворимый гель, что объясняется взаимодействием с ним белков сыворотки крови или полимеризацией мономера под влиянием тканевых жидкостей и белков [2, 10]. Наличие винилового радикала позволяет ему реагировать с нуклеофильными группами. Мономер взаимодействует с глутатионом и ингибирует глутатион-S-трансферазу в печени и мозге крыс [35]. S-b-пpoпионамидглутатионовый конъюгат выделяется с мочой в виде цистеина или N-ацетилцистеинового производного. Основной метаболит в моче — N-ацетилцистеин-S-b-пропионамид [36].

Известно, что АА-интоксикация сопровождается дегенеративными изменениями эпителия извитых почечных канальцев и клубочков, а также жировой дегенерацией и некрозом печени, на фоне подавления метаболизма порфирина [2].

Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о возможности влияния АА на репродуктивную функцию лабораторных животных [10], оказывая гонадотоксическое [37] и эмбриотоксическое [38] действие — оплодотворяющая способность и число зачатий у крыс снизились и увеличился процент постимплантационной гибели эмбрионов.

АА структурно сходен с мутагенами и канцерогенами — акрилонитрилом и винилхлоридом, он может реагировать с нуклеофильными сайтами или соединениями. Доминантное летальное действие он проявляет на стадии поздних сперматид и ранних сперматозоидов [10]. Добавление АА в корм мышей (500 мг на 1 кг корма) в течение 1, 2 и 3 нед оказывает мутагенное действие преимущественно на половые клетки, при этом уменьшается масса тестикул [39]. Однако мономер не проявляет мутагенной активности в различных тест-системах, в том числе на дрозофиле, в тесте на генные мутации, в клетках мышиной лимфомы [40].

Согласно [10], АА обладает также мутагенными и канцерогенными свойствами, индуцирует опухоли кожи и легких и вызывает хромосомные аберрации в зародышевых клетках мышей. Поступая с питьевой водой этот ксенобиотик повышает частоту возникновения доброкачественных и злокачественных опухолей щитовидной и молочных желез, надпочечников, грудной и ротовой полостей.

Cпектральные, полярографические и флуорометрические исследования свидетельствуют о микросомальном окислении акрилатов с образованием высокоактивных эпоксид-производных. Акрилаты являются субстратами І типа МОС печени, однако они обладают меньшим сродством и меньшей интенсивностью связывания с цитохромом Р-450 [41]. Однако, АА не влияет на общее содержание Р-450, но вызывает изменение состава его подфракций — уменьшает содержание подфракции с молекулярной массой 47000, не влияя на скорость снятия электронов с НАДФoН-зависимой редуктазы — начального звена микросомальной цепи окисления [42, 43].

АА обладает выраженными кумулятивными свойствами [2, 10, 11, 44]. Так, при его пероральном введении 1/5 и 1/10 LD₅₀ коэффициент кумуляции составляет 2,2 и 2,4 для мышей и 1,56 для крыс [44].

При применении АН в качестве инсектицида наблюдались отравления лиц, находившихся в обработанных помещениях [4, 45]. В легких случаях — беспокойство, слабость, головная боль, тошнота, рвотные движения, боли в желудке. Эти явления быстро проходили на свежем воздухе. Известны смертельные отравления детей, спавших в помещениях, недостаточно проветренных после окуривания АН [3, 46]. У взрослых в этих случаях отмечались признаки отравления, в том числе раздражение слизистых оболочек. Описан смертельный случай от втирания АН (~50 мл) в кожу головы 10-летней девочки [45, 46].

Симптомы АН-интоксикации при весьма высоких уровнях воздействия не являются специфичными и связаны в основном с поражением пищеварительной и дыхательной системы, центральной нервной системы, а также почек [3, 4, 6]. При ингаляционном воздействии АН [47], а также при пероральном и парентеральном введении летальных доз показано [4, 48, 49], что у животных наблюдается весьма сходная клиническая картина: возбуждение и вначале учащенное дыхание, которое сменяется быстрым поверхностным, а затем медленным затрудненным дыханием, за которым следуют судороги, кома и гибель животных [3, 4, 6, 8].

При очень кратком контакте и быстром удалении небольших количеств АН с кожи заметных последствий у человека не отмечается. Но если АН с кожи удаляется не сразу, появляется интенсивная краснота, жжение, в дальнейшем — ожоги. Даже после более или менее быстрого удаления АН без тщательного обмывания кожи через 10—24 ч развиваются ожоги II степени. При контакте с полимером, содержащим 5% свободного АН (чистка аппаратов в хлопчатобумажной одежде и контакт в течение 30 мин), возникали ожоги III степени, заживающие с рубцом, но относительно мало болезненные [50]. После 20—25-минутного воздействия паров в концентрации 0,3—0,5 мг/л возникает сильный зуд кожи не только на открытых, но и на закрытых участках тела [20, 50, 51].

Чрезкожное воздействие жидкого АН в больших дозах может приводить к смертельному исходу. При более низких уровнях воздействия АН-интоксикация характеризуется покраснением кожи ушей, носа, конечностей, а также слизистых оболочек, с последующим её шелушением и некрозом, сопровождается слезо- и слюнотечением, обильными слизистыми выделениями из носа как после ингаляционного воздействия, так и в результате перорального и подкожного введений ксенобиотика, тогда как у крыс после перорального его введения наблюдаются нарушения координации движений задних конечностей, парез и паралич [3, 4, 6, 8].

Симптомы отравления АН, наблюдаемые у человека при воздействии АН в высоких дозах, не являются специфическими: при остром ингаляционном воздействии отмечаются головные боли, бессонница, тошнота, рвота, понос, высокая утомляемость, желтуха средней выраженности, которая сохраняется несколько дней и сопровождается болями в печени и легкой анемией. Наряду с этим отмечается раздражение и воспаление слизистых оболочек респираторного тракта, чувство стеснения в верхних отделах дыхательной системы [4, 8]. В более редких случаях могут наблюдаться потеря сознания и судороги [3, 4].

При хроническом воздействии в производственных условиях отмечаются общая слабость, головокружение, головные боли, снижение работоспособности, плохой сон, бессонница, повышенная раздражительность, боли в грудной клетке, ухудшение аппетита, тошнота, рвота, носовые кровотечения. Степень выраженности этих симптомов тесно коррелирует с продолжительностью воздействия, но не с его интенсивностью или с возрастом рабочих [3].

Длительное вдыхание концентраций АН порядка тысячных долей мг/л в производственных условиях вызывает снижение артериального давления, приглушение тонов сердца, снижение глоточного рефлекса и повышение сухожильных рефлексов [3, 4, 52].

При АН-интоксикации наблюдаются изменения гематологических показателей: снижение уровня гемоглобина, числа эритроцитов и лейкоцитов, содержания нейтрофилов при увеличении индекса лимфоцитов и сывороточного железа, угнетение процесса созревания нормобластов в костном мозге [3], а также увеличение содержания окисленного глутатиона и снижение количества сульфгидрильных групп [16]. Отравления АН характеризуются также повышением активности сывороточной холинэстеразы, гипербилирубинемией, снижением коллоидной устойчивости сыворотки крови, гипергаммаглобулинемией [53]. При попадании на глаз развивается блефароконъюнктивит [54]. Со стороны желудочно-кишечного тракта наблюдаются признаки гастрита и колита [55]. О влиянии ксенобиотика на нервную систему свидетельствуют развитие тошноты, рвоты, головокружения, депрессии и изменения функционального состояния вегетативной нервной системы (снижение артериального давления, лабильность пульса, разлитой дермографизм, потливость, расстройства вестибулярного аппарата) [3, 4].

Интоксикация АН вызывает снижение в головном мозге уровня ГАМК, причиной чего может быть ингибирование фермента биосинтеза ГАМК — глутаматдекарбоксилазы [4]. Возможная ограничивающая роль ГАМК в развитии стресс-синдрома [56], а также тот факт, что отклонения в деятельности мозга в ряде случаев являются следствием нарушений соотношения уровней биогенных аминов в различных его отделах [57], позволяют полагать, что ряд симптомов отравления АН (повышенная возбудимость, некоторая гиперрефлексия, переходящая в судороги, завершающиеся параличом и смертью [8]) могут быть связаны с результирующим эффектом высоких концентраций биогенных аминов на фоне пониженного уровня ГАМК.

О повреждении клеточных мембран при отравлении АН свидетельствует увеличение в крови активности альдолазы, что наблюдается только при нарушении проницаемости плазматической мембраны гепатоцитов [8], а также снижение содержания цитохрома Р-450 микросом [3]. Подтверждением мембранотоксического действия АН являются опыты с фосфорилазой и дисульфидредуктазой — регуляторными ферментами углеводного и тиол-дисульфидного обмена. Обнаружено, что хотя базальная активность дисульфидредуктазы в печени отравленных крыс (0,19 ммоль АН на 1 кг) снижена, сохраняется чувствительность фермента к активирующему влиянию 3', 5'-АМФ, действующему дистальнее плазматической мембраны на уровне протеинкиназы [57].

Острое отравление АН вызывает снижение в органах содержания норадреналина, адреналина, развитие гиперадреналин- и гипернорадреналинемии, что объясняется выходом в кровь норадреналина из симпатических нервных окончаний и одновременным усилением биосинтеза катехоламинов в надпочечниках, где содержание аминов было устойчиво выше контрольных величин. Вероятно, для формирования адаптивных реакций при отравлении АН имеет значение стимуляция центрального, медиаторного и гормонального отделов симпатико-адреналовой системы [57, 58].

АН необратимо связывается с белками селезенки, легких, почек, мозга. Это объясняется [4, 53] высокой способностью яда угнетать сульфгидрилзависимые ферменты — лактатдегидрогеназы, L-идитолдегидрогеназы, пируватоксидазы, что реализуется снижением концентраций тканевого глутатиона и белковых сульфгидрильных групп в крови, печени, головном мозге, почках и приводит к нарушению утилизации глюкозы [4].

Данные литературы [15, 58] свидетельствуют о том, что угнетение сульфгидрильных соединений в тканях организма может быть результатом воздействия не только самого АН, но и его активного метаболита — глицидонитрила. Помимо этого обнаружена микросомальная активация ксенобиотика с образованием высокореактивных промежуточных продуктов.

Некоторые иммунотоксические эффекты АН могут являться следствием ингибирования неспецифических эстераз иммуноцитов, что позволяет рассматривать реактиваторы холинэстеразы в качестве средств иммунокоррекции с целью профилактики постинтоксикационных инфекционных осложнений и заболеваний [1].

Под влиянием АН происходит снижение формирования гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) без переноса спленоцитов в 1,9 раза [1, 3], уменьшается способность спленоцитов доноров к реализации вторичного клеточного иммунного ответа вследствие снижения активности a-нафтилбутиратэстеразы клеток селезенки. Существуют основания считать, что при этом инактивируется эстераза Т-хелперов типа I (Th1), продуцирующих гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, ИЛ-3, а также определяющие при переносе спленоцитов формирование ГЗТ g-интерферон, ИЛ-2, b-фактор некроза опухоли (лимфотоксин). Кроме снижения активности исследованного энзима в селезенке отмечается его редукция в клетках подколенных лимфоузлов [1].

Одним из механизмов снижения клеточного иммунитета при остром отравлении АН (1/2 ЛД₅₀), оцениваемого по формированию ГЗТ в различных моделях, является уменьшение активности a-нафтилбутиратэстеразы в спленоцитах и клетках подколенных лимфоузлов [3]. АН уменьшает эффект переноса супрессорных клеток в реакции ГТЗ. При этом реакция не сопровождается существенным снижением активности a-нафтилбутиратэстеразы в спленоцитах и клетках подколенных лимфоузлов реципиентов [1].

При добавлении в микросомальную систему печени мыши, крысы и человека АН образует специфические комплексы с цитохромом Р-450 [59—61], угнетая его. По данным литературы [62], глицидонитрил, образуемый в микросомах печени крыс оксидазами со смешанной функцией, ковалентно связан с мембранными протеинами микросом. У крыс после предварительного введения индукторов системы микросомальных оксидаз, например, фенобарбитала, с макромолекулами связывается повышенное количество глицидонитрила, а в крови наблюдается усиление активности фруктозобифосфатальдолазы, что указывает на значительное увеличение токсического действия АН на гепатоциты [63]. С другой стороны, специфический ингибитор цитохрома Р-450 SKF-525A уменьшает токсические эффекты АН как in vitro, так и in vivo. Следовательно, метаболиты АН могут быть причиной развития распространенного цитотоксического эффекта.

Значительное уменьшение соотношения окисленной и восстановленной форм никотинамидадениндинуклеотидов показано в мозге крыс после подкожного введения АН в дозе 100—120 мг/кг [64], что указывает на угнетение НАДФ·Н в митохондриях. Эти изменения имеют важное значение, поскольку их количественные уровни сходны с теми, которые наблюдаются при гибели животных в условиях экспериментальной гипоксии. Следовательно, опосредованное цианидом угнетение цитохром с-оксидазы играет важную роль на заключительных стадиях интоксикации. Этот "цианидный эффект" сильнее выражен при действии АН в высоких дозах и играет более важную роль у мышей и собак, чем у крыс [65].

Обладая комплексообразующими свойствами, АН связывает поливалентные ионы и нарушает межорганные взаимоотношения и обмен биогенных аминов во всем организме [53, 66], инактивирует также ферментные системы, содержащие Fe²⁺ [67, 68], при этом отмечается разобщение окислительного фосфорилирования [3]. Известно также, что АН стимулирует спонтанное перекисное окисление липидов в печени крыс [57, 59] и в мембранах эритроцитов [57, 62].

При отравлениях АН образующийся в процессе биотрансформации цианид может существенно подавлять активность цитохром с-оксидазы в головном мозге, почках, печени крыс. В условиях in vitro 50% снижение активности этого фермента в гомогенатах тканей головного мозга, почек, печени наблюдается при концентрации яда 10^-3 М. Такое действие на фермент отмечается и в условиях in vivo сразу после воздействия летальных доз АН, однако период полуэлиминации ксенобиотика в крови и печени после внутрибрюшинного или внутривенного введений незначителен и составляет 15—20 минут. У крыс после введения АН наблюдается повышение концентрации цианида в крови и печени в сочетании со значительным угнетением цитохром с-оксидазы [69].

При введении АН крысам, в крови которых имелся метгемоглобин, обнаруживается комплекс CNMtHb [3].

АН оказывает ингибирующее действие на стимулированное калием дыхание участков коры головного мозга [8].

Кроме того АН ингибирует холинэстеразу и повышает активность фруктозомонофосфатальдолазы, что свидетельствует о побочном действии на печень [59]. При вскрытии крыс спустя 24 ч после введения яда обнаруживается очаговый поверхностный некроз печени в сочетании с геморрагическим гастритом [70], наблюдаются геморрагические очаги в надпочечниках, легких [3, 4], острое воспаление желудочно-кишечного тракта [20].

В опытах на сальмонеллах АН давал выраженный мутагенный эффект на штамме ТА 1535 в присутствии полной системы метаболической активации [71]. В опытах [72] на мышах ингаляция АН в концентрации 20 и 100 мг/м³ не повышала частоту клеток с аберрациями хромосом в костном мозге и сперматогониях. Процент аберрантных метафаз в костном мозге мышей контрольной группы был 1,6, при 20 мг/м³ — 1, при 100 мг/м³ — 1,3, в сперматогониях соответственно 0,8, 0,4 и 0,8. При этом аберрации были представлены одиночными и парными фрагментами. Ингаляционное воздействие АН в обеих концентрациях не влияло на уровень доминантных деталей в половых клетках самцов мышей. Фертильность самцов, число имплантаций, живых и мертвых эмбрионов, общая, до- и постимплантационная смертность животных опытных групп не отличались от таковых в контроле на всех неделях скрещивания после окончания затравки [71].

АН в водном растворе и газовой фазе индуцирует мутации у штаммов S. typhimurium, выявляющих мутации типа замены оснований (ТА 1530, ТА 1535, ТА 1950, ТА 100), в присутствии системы метаболической активации с гомогенатами печени мышей и крыс. Мутагенность вещества связывалась с его метаболитами — глицидонитрилом и глицидиальдегидом [71, 72].

Однако в опытах на млекопитающих мутагенный эффект отсутствует даже при действии субтоксичных доз АН. При подостром ингаляционном воздействии в концентрациях, равных 0,3 и 0,06 ЛK₅₀, не отмечено повышения частоты аберраций хромосом в соматических и половых клетках и доминантных деталей у самцов мышей. Отсутствие цитогенетических нарушений в соматических клетках и доминантных деталей у самцов наблюдалось в острых и подострых опытах на мышах и крысах при внутри-брюшинном и пероральном введении АН в дозах от 0,25 до 0,5 LD₅₀ [73].

АН является канцерогенным агентом — при его введении наблюдается развитие опухолей центральной нервной системы, языка, цимбаловой железы, желудка, тонкого кишечника и молочной железы.

Таким образом, данные литературы указывают на многогранность клинической картины острой и хронической интоксикации АК и её производными, что свидетельствует о политропности их токсического действия.

Лечение отравлений изучаемыми ксенобиотиками сводится, как правило, к использованию лишь общепринятых дезинтоксикационных мероприятий и средств симптоматической терапии.

В случае острого отравления после оказания неотложной медицинской помощи назначаются комбинированная терапия — форсированный диурез, плазмозамещающие растворы, энтеросорбенты, церебропротекторы, гепатопротекторы, нефропротекторы, а также препараты симптоматической терапии: кордиамин, строфантин, аминазин, оротат калия, кокарбоксилаза, АТФ и др. Заметное терапевтическое действие при интоксикации этими ксенобиотиками оказывают комбинации антиоксиданта a-токоферола ацетата, никотиновой кислоты, аскорбиновой кислоты, витамины В₁, В₁₂, а также препараты, содержащие глутатион, цистеин, метионин [2—4, 57]. В тяжелых случаях проводится экстракорпоральная детоксикация организма (гемосорбция, гемодиализ, плазмоферез, плазмосорбция).

В условиях стационара при хронической интоксикации применяется оксигенотерапия, витамины группы В, инсулин с глюкозой, физиопроцедуры и средства, обладающие анаболической активностью [75].

Профилактика интоксикаций акрилатами в настоящее время осуществляется путем проведения общепринятых санитарно-гигиенических, медицинских мероприятий и строгим соблюдением правил техники безопасности при работе с АК и её производными [2—5]. В комплексе средств профилактических и лечебных мероприятий, проводимых на здравпунктах предприятий и в профилакториях, используют адаптогены (элеутерококк, китайский лимонник), антиоксиданты [76], комплексные витаминные препараты [4, 75]. Рацион питания рабочих, занятых в производстве и использовании АК и её производных, дополняют продуктами, богатыми глутатионом, цистеином, метионином (дрожжи, хлебный квас, печень, творог) [3, 4, 75].

Таким образом, анализ данных литературы по токсикологии, терапии и профилактике отравлений АК и её производными АА и АН позволяет заключить, что в настоящее время лечение отравлений данными химическими токсикантами проводится лишь с использованием неспецифических средств терапии, что не позволяет существенно снизить летальность. Эффективные средства лекарственной профилактики интоксикаций АК, АА и АН до настоящего времени отсутствуют.

Литература
1. Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., Ромащенко С.А., Германчук В.Г. Влияние реактиватора холинэстеразы дипироксима на формирование гиперчувствительности замедленного типа в различных моделях при острой интоксикации акрилонитрилом // Экспериментальная и клиническая фармакология. —2000. —Т. 63, №5. —С. 47-49.
2. Акриламид // Гигиенические критерии состояния окружающей среды. —1989. —№49. —109 с.
3. Акрилонитрил // Гигиенические критерии состояния окружающей среды. —1987. —№28. —114 с.
4. Шустов В.Я., Кузнецов П.П. Акрилонитрил: токсические свойства, гигиеническая оценка. М.: Медицина, 1984. —71 с.
5. Тихомиров Ю.П. Влияние выбросов производств акрилатов на окружающую среду и профилактика их неблагоприятного воздействия // Вестник Академии медицинских наук СССР. —1991. —№2. —С. 21-25.
6. Комиссаров И.В. О влиянии нитрила акриловой кислоты на организм животных (экспериментальное исследование). Автореф. дис… канд. мед. наук. —Минск, 1955. —17 с.
7. Baxter R.A. Evaluation and control of industrial exposure of acrylonitrile // Ann. occup. Hyg. —1979. —V. 22, №4. —P. 429-435.
8. Grahl V.R. Toxicology und Wirkungsweise von Acrylnitril // Zbl. Arbeitsmed. —1970. —Bd. 12. —S. 369-378.
9. Боклаг Э.П. Гигиена труда в производстве нитрила акриловой кислоты методом окислительного аммонолиза пропилена. Автореф. дис… канд. мед. наук. —Киев, 1978. —21 с.
10. Шефтель В.О. Токсические свойства акриламида (обзор) // Гигиена и санитария. —1990. —№8. —С. 48-50.
11. Румянцева Г.И., Новиков С.М., Козеева Е.Е., Мещерякова С.А. Экспериментальные исследования биологического действия акриламида. // Гигиена и санитария. —1980. —№9. —С. 38-41.
12. Tilson H.A. The neurotoxicity of acrylamide: an overview // Neurobehav. Toxicol. Teratol. —1981. —№3. —P. 113-120.
13. Воронкова И.А. Гигиена, промышленная токсикология и профпатология в производствах полиакрилатов и сырья для них. —М., 1984. —С. 5-9.
14. Shackelford W.M., Keith L.H. Frequency of organic compounds identified in water. Athens GA, USA, US Enviromental Protection Agency, 1976. —P. 55.
15. Kopecky J., Gut I., Nerudova J., Zachardova D. Two routes of acrylonitrile metabolism // J. Hyg. Epid. Microbiol. Immunol. —1980. —№24. —P. 356-362.
16. Kopecky J., Zachardova D.,Gut I. New findings on acrylonitrile metabolism // Czech. Med. —1980. —V. 3, № 4. —P. 295-301.
17. Brown L., Rhead M.M., Bancroft K.C.C. Model studies of the degradation of acrylamide monomer // Water Res. —1980. —№14. —P. 775-778.
18. Croll B.T., Arkell G.M., Hodge R.P.J. Residues of acrylamide in water // Water Res. —1974. —№8. —P. 989-993.
19. Going J. E., Kuykendahl P., Long S., Onstot J., Thomas K. Environmental monitoring near industrial sites: acrylonitrile. —1979. —285 p.
20. Довжанский И.С. Патогенез, клиника и профилактика дерматозов у рабочих на производстве синтетического волокна нитрон. Автореф. дис… канд. мед. наук. —Саратов, 1975. —15 с.
21. Маврина Е.А. Вопросы гигиены труда и химические аллергены в производстве нитрона // Гигиена труда и профессиональные заболевания. —Рига, 1979. —Вып. 3. —С. 21-25.
22. Tatsuno T., Inoue T., Tanimura A. Hygienic chemical studies on plastics (II). Residual acrylonitrile in ABS resin or AS resin and its migration into water // Report of the National Institute of Hygiene. —1979. —№97. —P. 93-97.
23. Tatsuno T., Inoue T., Tanimura A. Hygienic chemical studies on plastics (V). Migration of acrylonitrile from acrylonitrile-butadiene-styrene copolymer and acrylonitrile-styrene copolymer into various food simulating solvents in long period // Report of the National Institute of Hygiene. —1980. —№98. —P. —110-115.
24. Арзяева Е.М., Осина Т.М. Гигиена, промышленная токсикология и профпатология в производствах полиакрилатов и сырья для них. —М., 1974. —С. 57-66.
25. Соловьева М.С. Гигиена, промышленная токсикология и профпатология в производствах полиакрилатов и сырья для них. —М., 1984. —С. 103-113.
26. Светлаков А.В., Иванов В.В., Фефелова Ю.А., Голоунин А.В. Распределение в организме и взаимодействие с белками крови крыс бутилового эфира акриловой и метакриловой кислот // Гигиена труда и проф. заболевания. —1989. —№3. —С. 51-52.
27. Kesson C.M., Lawson D.H., Baird A.W. Acrylamide poisoning // Postgrad. Med. J. —1977. —№53. —P. 16-17.
28. Mapp C., Mazzotta M., Bartolucci G.B., Fabbri L. Neuropathy due to acrylamide: First observations in Italy // Med. Lav. —1977. —№68(1). —P. 1-12.
29. Garland T.O., Patterson M.W. Six cases of acrylamide poisoning // Br. Med. J. —1967. —№4. —P. 134-138.
30. Takahashi M., Ohara T., Hashimoto K. Electrophysiological study of nerve injuries in workers handling acrylamide // Int. Arch. Arbeitsmed. —1971. —№28. —P. 1-11.
31. Cavanagh J.B., Gysberg M.F. Ultrastructural features of the Purkinje cell damage caused by acrylamide in the rat: A new phenomenon in cellular neuropathology // J. Neurocytol. —1983. —№12. —P. 413-437.
32. Igisu H., Goto I., Kawamura Y., Kato M. Acrylamide encephaloneuropathy due to well water pollution // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatr. —1975. —№38. —P. 581-584.
33. Остапова И.Ф. Фармакокинетика, токсикология и фармакодинамика акриламида, метакриламида и диацетонакриламида. Автореф. дис… канд. мед. наук. —Ярославль, 1981. —17 с.
34. Новиков С.М., Новикова Е.Е. // Гигиена и токсикология высокомолекулярных соединений и химического сырья, используемого для их синтеза. —Л., 1979. —С. 277.
35. Dixit R., Mukhtar H., Seth P.K., Krishna Murti Conjugation of acrylamide with glutathione catalised by glutathione-S-transferases of rat liver and brain // Biochem. Pharmacol. —1980. —№30 (13). —P. 1739-1744.
36. Miller M.J., Carter D., Sipes I.G. Pharmacokinetics of acrylamide in Fisher — 344 rats // Toxicol. Appl. Pharmacol. —1982. —№63. —P. 36-44.
37. Перова Н.М. Токсикологическое изучение полимеров винилкапролактама и акриламида, предполагаемых к использованию в медицине, и их гигиеническая регламентация. Автореф. дис… канд. мед. наук. —М., 1977. —17 с.
38. Kankaanpaa J., Elovaara E., Hemminki K., Vainio H. Embriotoxicity of acrolein, acrylonitrile and acrylamide in developing chick embryos // Toxicol. Lett. —1979. —№4. —P. 93-96.
39. Shiraishi Y. Chromosome aberrations induced by monomeric acrylamide in bone marrow and germ cells of mice // Mutat. Res. —1978. —№57. —P. 313-324.
40. Кнаап А. и др.// Европейское общество по мутагенам внешней среды: Ежегодная конференция. Тезисы докладов. —М., 1984. —С. 247.
41. Котловский Ю.В., Бекерев В.Е., Бачманова Г.И., Иванов В.В. Взаимодействие акрилатов с системой микросомального окисления печени крыс // Вопросы медицинской химии. —1985. —№6. —С. 74-77.
42. Котловский Ю.В., Гришанова А.Ю., Иванов В.В. Взаимодействие метилметакрилата и акриламида с системой микросомального окисления печени крыс // Вопросы медицинской химии. —1984. —№5. —С. 44-47.
43. Nilsen O.G., Tofgard R., Ingelman-Sundberg M., Gustafsson J.-A. Qvalitative alterations of cytochrone P-450 in mouse liver microsomes after administration of acrylamide and methylmethycrylate // Acta Pharmacol. Toxicol. (Copenhagen). —1978. —№43. —P. 299-305.
44. Козеева Е.Е. Производство и экспериментальные исследования по гигиенической оценке акриламида. Автореф. дис… канд. мед. наук. —М., 1980. —19 с.
45. Lorz H. On the percutaneous poisoning by acrylonitrile (Ventox) // Dtsch med. Wochenschr. —1950. —№75 (33/34). —P. 1087-1088.
46. Grunske F. Ventox and ventox-poisoning // Dtsch med. Wochenschr. —1949. —№74. —P. 1081.
47. Rogaczewska T. Oznaczanie akrylonitrylu w powietrzu // Med. Pracy. —1976. —V. 27, №2. —P. 115-126.
48. Graham J.P.D. Hydroxycobalamin as an antidote to acrylonitrile // Toxicol. Appl. Pharmacol. —1965. —№7. —P. 367-372.
49. Paulet G., Desmos J., Battig J. De la toxicite de l'acrylonitrile // Arch. Mal. Prof. —1966. —№27 (12). —P. 849-856.
50. Бабанов Г.П. Местные проявления действия нитрила акриловой кислоты на кожу и слизистые оболочки // Врачебное дело. —1957. —№5. —С. 511-514.
51. Антоньев А.А., Рогайлин В.И. Профессиональные дерматозы, вызываемые акрилонитрилом, и их профилактика // Тр. Пермского гос. мед. института. —1970. —Т. 99. —С. 103-106.
52. Бабанов Г.П., Ключиков В.Н., Караева Н.И., Лилеева З.В. Клиника хронической интоксикации нитрилом акриловой кислоты // Врачебное дело. —1959. —№8. —С. 833-836.
53. Шустов В.Я., Кузнецов П.П. Токсическое воздействие акрилонитрила на кроветворную систему // Мед. реф. журн. —1983. —Разд. 7, №5, публ. 1518.
54. Delivanova S., Popovski P., Orusev T. Blepharoconjunctivitis in workers of the polyacrylonitrile synthetic fibre industry // God. Zb. Med. Fak. Skoje. —1978. —№24. —P. 279-282.
55. Еникеева Н.А., Островская Р.С., Сыса Л.В. и др. Гигиена труда и состояние здоровья работающих в современном производстве синтетического волокна нитрон // Гигиена труда и охранa здоровья рабочих в нефтяной и нефтехимической промышленности. —М., 1976. —Т. 9. —С. 22-25.
56. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. —М.: Медицина, 1981. —96 с.
57. Иванов В.В., Альшанский А.М. Компоненты ГАМК-ергической системы и перекисное окисление липидов при острой экзогенной интоксикации акрилонитрилом // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. —1982. —Т. 94, № 7. —С. 40-43.
58. Holechek V., Kopecky J. Conjugation of glutathione with acrylonitrile and glycidonitrile // Industrial and environmental xenobiotics. —Berlin: Springer Verlag, 1981. —P. 239-245.
59. Иванов В.В., Жирнов Г.Ф., Бачманова Г.И. Взаимодействие акрилонитрила с системой микросомального окисления печени крыс // Вопросы мед. химии. —1979. —Т. 25, №4. —С. 468-471.
60. Аppel K.E., Peter H., Bolt H.M. Effect of potential antidotes on the acute toxicity of acrylonitrile // Int. Arch. Occup. environ. Health. —1981. —№49. —P. 157-163.
61. Аppel K.E., Peter H., Bolt H.M., Bolt M. Interaction of acrylonitrile with hepatic microsomes of rats and man // Toxicol. Lett. —1981. —№7 (4-5). —P. 335-340.
62. Иванов В.В., Жирнов Г.Ф., Арчаков А.И. Активация акрилонитрила в микросомальной системе окисления // Вопросы мед. химии. —1982. —Т. 20, №2. —С. 95-98.
63. Иванов В.В. Оценка роли метаболизма акрилонитрила в механизме его токсического действия // Гигиена труда. —1981. —№9. —С. 48-50.
64. Sokal J.A., Klyszejko-Stefanowicz L. Nicotinamide-adeninedinucleotides in acute poisoning with some toxic agents // Lodz Tow. Nauk. —1972. —№112. —P. 64-101.
65. Willihite C.C., Smith R.P. The role of cyanide liberation in the acute toxicity of aliphatic nitriles // Toxicol. Appl. Pharmacol. —1981. —№59. —P. 589-602.
66. Можарова В.А. К вопросу комплексообразования метила и нитрила акриловой кислоты с гемоглобином. —В кн.: Изучение влияния производственных химических факторов на организм человека. —Саратов, 1979. —С. 75-78.
67. Соловьев И.И. Обмен веществ головного мозга при нейроинтоксикациях и восстановительные процессы в мозговой ткани. Автореф. дис… д-ра мед. наук. —Томск, 1972. —33 с.
68. Ширшова Н.А. Роль цитохимических исследований лейкоцитов в клинико-гематологической оценке здоровья рабочих производства искусственных волокон. Автореф. дис… канд. мед. наук. —М., 1979. —14 с.
69. Gut I., Kopecky J., Nerudova J. Relationship between acrylonitrile biotransformation, pharmacokinetics and acute toxicity. A short review // G. Ital. Med. Lav. —1981. —№3. —P. 131-136.
70. Silver E.H., McComb D.J., Kovacs K., Szabo S. Limited hepatotoxic potential of acrylonitrile in rats // Toxicol. Appl. Pharmacol. —1982. —№64. —P. 131-139.
71. Milvy P., Wolff M. Mutagenic studies with acrylonitrile // Mut. Res. —1977. —V. 48. —P. 271-278.
72. de Meester C., Poncetelet F., Roberfroid M., Mercier M. Mutagenicity of acrylonitrile // Toxicology. —1978. —V. 21, №1. —P. 19-27.
73. Журков В.С., Шрам Р.Я., Дуган А.М. Анализ мутагенной активности акрилонитрила // Гигиена и санитария. —1983. —№1. —С. 71-72.
74. Maltoni C., Ciliberti A., Carretti D. Experimental contributions in identifying brain potential carcinogens in the petrochemical industry // Ann. N. Y. Acad. Sci. —1982. —№381. —P. 216-249.
75. Соловей Л.И. Влияние интоксикации альфа-метилстиролом и нитрилом акриловой кислоты на показатели белкового, липидного и углеводного обмена и пути терапевтического воздействия (экспериментальное и клиническое исследования). Автореф. дис… д-ра мед. наук. —Новосибирск, 1973. —49 с.
76. Иваннов В.В., Климацкая Л.Г. Использование антиоксидантов для предупреждения гепатотоксического эффекта акрилонитрила // Фармакология и токсикология. —1984. —№5. —С. 96-99.