МЕХАНИЗМЫ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ АКТИВНЫХ МОЛЕКУЛ КИСЛОРОДА И РАЗВИТИЕ АПОПТОЗА

Институт кардиологии им. Н.Д. Стражеско г. Киев,
Национальный медицинский университет им. А.А. Богомольца, г. Киев

Введение. В последние годы детально изучается роль активных молекул кислорода (АМК): О₂^–, О₂¹, H₂O₂ и др.) в развитии апоптоза [1, 2, 8, 10].

Это связано с тем, что высоко реакционные АМК образуются во всех "аэробных клетках". В физиологических условиях их цитотоксическое влияние сдерживается многоуровневой системой антиоксидантов. Прямое действие Н₂О₂ [3], NО^•[4], пероксинитрита (ONOO^•–) [5], пестицидов разных классов [6], проникающей радиации, ультрафиолетового излучения [7], а также комплекса пестицидов в сочетании с нитратами, солями тяжелых металлов (свинца, кадмия) и проникающей радиации [8], индуцирующих образование АМК, активизирует апоптоз. При разных формах индуцированого апоптоза выявлено снижение активности элементов антиоксидантной защиты клеток [10]. Клетки, имеющие дефекты антиоксидантной защиты, наиболее чувствительны к воздействиям, вызывающим апоптоз [11]. Кроме того, в ряде исследований показан защитный эффект антиоксидантов в этом процессе [12]. Несмотря на очевидную взаимосвязь окислительного стресса (ОС) с апоптозом, роль активных форм кислорода в саморазрушении клеток и механизмы реализации цитотоксичности не ясны. Более того, нет однозначного ответа на вопрос: чем является окислительный стресс — следствием или индуктором функциональных изменений, сопровождающих развитие апоптоза. В обзоре обобщены сведенья литературы по этим вопросам, а также приведены данные АМК — зависимого участия TNF-, Fas-, Bcl-2 факторов в индукции апоптоза.

РОЛЬ АМК в качестве вторичных трансмембранных мессенджеров

Известно, что нарушение сбалансированности антиоксидантной (АОС) и прооксидантной систем (ПОС) обусловливает развитие окислительного стресса (ОС). Системы, участвующие в образовании АМК, и процессы, связанные с окислительной альтерацией биологических соединений, условно объединены понятием прооксидантная система. Токсическое действие АМК предотвращается в организме за счёт функционирования антиоксидантной защиты, которая представлена ферментативными и не ферментативными компонентами. К первым относят супероксиддисмутазу (СОД), каталазу, глютатионпероксидазу, фосфолипид-гидропероксид-глютатионпероксидазу, глютатион-s-трансферазу, тиол-специфическую пероксидазу, тиоредоксин редуктазу, глютатионредуктазу [13]. Нарушение соотношения ферментативных компонентов АОЗ может приводить к дополнительной генерации АМК и является одним из проявлений ОС. В организме существует определённое равновесие между ферментативными и неферментативными элементами АОЗ, так как последние могут при ряде патологических состояний выступать в качестве прооксидантов. Так аскорбиновая кислота и восстановленные тиолы функционируют в качестве основных антиоксидантов цитозоля [2]. Метаболический фон любой клетки зависит от характера сигналов, поступающих из окружающей среды. Носителями этой информации являются первичные мессенджеры: гормоны, цитокины, нейротрансмиттеры. Этот процесс осуществляется за счёт клеточной сигнализации или сигнальной трансдукции [12, 20]. В передаче сигнала через клеточную мембрану участвуют вторичные мессенджеры. В качестве вторичных посредников активное участие принимают АМК (О₂^–, Н₂О₂, ОН^• и гидроперекиси липидов), осуществляя регулирующую роль в процессах пролиферации, апоптоза, клеточной адгезии, свертывания крови и т. д. [14—21]. Если рассматривать АМК с позиций их действия в физиологических концентрациях в качестве вторичных посредников, то их образование при передаче сигнала должно быть опосредовано лиганд-рецепторным взаимодействием. В качестве таких лигандов могут выступать гормоны (инсулин, ангиотензин, паратиреоидный гормон, витамин Д₃), цитокины, факторы роста. Образование лиганд-рецепторных комплексов сопровождается образованием АМК, которые активно включается в сигнальную трансдукцию, влияя на ключевые звенья метаболических процессов в клетке [20].

Действительно, имеются экспериментальные подтверждения участия АМК в передаче сигнала, связанного с действием первичных мессенджеров. Первичные мессенджеры осуществляют регуляцию уровня АМК в клетке за счёт активации процессов их генерации, с одной стороны, и снижения активности отдельных звеньев АОЗ, с другой. В этом процессе активное участие принимают цитокины. Цитокины стимулируют освобождение АМК из многих типов клеток, включая фибробласты человека, эпителиальные и эндотелиальные клетки [22]. С АМК связана передача сигнала от тромбоцитарного фактора роста [23], эпидермального фактора роста [24], трансформирующего фактора роста b-1 [25, 26], фактора некроза, опухолей (TNF) [26]. Участие интерлейкина-1 и интерферона в сигнальной трансдукции связывают с образованием О^•₂^– [1], TNF-a, -с, Н₂О₂ [27]. TNF-a, через повышение образования АМК, активирует факторы транскрипции NF — к В и АР-1 процессы апоптоза [28, 29].

В литературе активно обсуждается возможная физиологическая роль оксидантов в регуляции Са²⁺-сигнала и фосфорилирования белков, с которыми связаны многочисленные процессы в клетке [12, 30]. Показано, что Н₂О₂ влияет на транспорт Са²⁺ через плазматическую мембрану [31]. Роль внеклеточного Са²⁺ в оксидант-стимулированной трансдукции изучена на примере индуцирования экспрессии протоонкогенов за счёт О^•₂^– в проксимальных тубулярных эпителиальных клетках почек [32]. Экспрессию гена с-fos, стимулированную О₂^•–, который генерировала система ксантин/ксантиноксидаза, блокирует СОД, а не каталаза. Предполагается, что этот процесс связан с состоянием тиоловых структур мембран, соотношением их окисленных и восстановленных форм [33].

Оксидант-опосредованное освобождение Са²⁺ может осуществляться и за счет других источников. Ими могут быть митохондрии, Са²⁺-связывающие белки. В случае с митохондриями очень трудно отдифференцировать физиологическую роль оксидантов (в частности t-BOOH) в клеточной сигнализации от их токсического действия [34].

Другим важным звеном участия оксидантов в процессе сигнальной трансдукции является фосфорилирование белков. Наиболее точно изучен серин /треонинкиназы/фосфатазы и тирозинкиназы/фосфатазы [22]. В эндотелиальных клетках, обработанных оксидантами, повышается активность тирозинкиназы и снижается активность фосфатазы. Генерация АМК приводит к активации протеинтирозинкиназы и протеинкиназы С (ПКС), что сопровождается стимуляцией, в частности, МАР-киназ [35]. МАР-киназы (c-Jun-N-терминальная киназа и р 38) связаны с состоянием ОС и процессом апоптоза. Через первичные мессенджеры (TNF-, интерлейкины 6 и 2) при участии оксидантов процесс активации MAP-киназ осуществляется за счет их фосфорилирования. Активированные MAP-киназы перемещаются к ядрам, где они фосфорилируют белки-мишени, связанные с функционированием факторов транскрипции. Оксиданты увеличивают активность MAP-киназы в нейтрофилах, участвуя в регуляции иммунного ответа организма [36]. Таким образом, оксиданты, увеличивая активность различных протеинкиназ, участвуют в регуляции многочисленных клеточных процессов, таких как клеточная адгезия, пролиферация, сигнальная трансдукция, апоптоз и т.д. [12].

АМК зависимое влияние ОС на индукцию апоптоза.

Механизм апоптоза во многом еще загадочен. Программируемая гибель клеток вовлечена в регуляцию развития, дифференцировки и тканевого гомеостаза через связь с процессами транскрипции и трансляции и, в норме, жестко контролируется [1, 12]. В этой ситуации важно уточнить "основные сдвиги", происходящие в клетке на старте апоптоза. Анализ имеющихся в литературе данных достаточно определенно указывает на предапоптозные нарушения в митохондриях [2]. В норме аэробная клетка располагает специальными механизмами предотвращения избыточного образования в митохондриях О₂^•– и продуктов его последующих превращении [37]. Если по каким-то причинам в указанных механизмах возникают нарушения и они становятся дефектными, то концентрация О₂^•– и перекисных соединении возрастает. С этим сдвигом связывается факт образования пор во внутренней мембране митохондрий, рассматриваемый как необходимый этап, ведущий к появлению апоптоза [38]. Утрата митохондриями цитохрома с приводит, прежде всего, к нарушению окислительного фосфорилирования, потере мембранного потенциала митохондрий, повышению внутриклеточных уровней рО², АМК и пероксидации. Эти события рассматриваются как про- и предапоптозные [38]. В пользу представлений о роли свободно-радикального механизма запуска апоптоза свидетельствует достаточно большое число фактов [14]. Прямая причастность АМК и перекисных соединений к индукции апоптоза показана на примере самых различных как нормальных[28, 29], так и опухолевых клеток [9, 39, 48], причем последние теряют способность к апоптозу при гипоксии [52].

Пероксинитрит и NO-радикалы

Сильным окислителем, причастным к апоптозу различных клеток, является пероксинитрит [40]. Он же известен как ингибитор митохондриального дыхания [41] и марганецсодержащей супероксиддисмутазы (Мn-СОD) [14], что вызывает ОС. В зависимости от концентрации апоптоз индуцируют NО, ¹О₂, Н₂О₂ и их комбинации [42]. Апоптоз индуцируется также окислительным стрессом, возникающим в процессе ишемии — реперфузии [43, 44]. Свое представление об АМК — зависимом апоптозе при реперфузии изложил В.П. Скулачев [37], полагая, что повреждающим агентом в основном является радикал ОН^•, образующийся при участии Fe²⁺ в реакции Фентона.

Известно, что пероксинитрит (ONOO^–) способен окислять NH- и SH-группы белков, что приводит, в частности, к инактивации a-ингибитора протеиназ, тканевого ингибитора металлопротеиназы-1, Mn- и Fe- СОD. В клетках ОNОО^– индуцирует процессы перекисного окисления липидов в мембранах [45]. Под действием ONOO^– (1—100 мМ) посредством апоптоза элиминируются опухолевые клетки линий HL-60 и V-937, но не нормальные моноциты и эндотелиоциты. Экзогенная СОД усиливала, а каталаза и N-ацетилцистеин ингибировали фрагментацию ДНК и саморазрушение клеток HL-60, индуцируемое пероксинитритом [5]. Запрограммированная гибель нейрональных клеток PC 12, в которых репрессирована Си-, Zn- СОД [29], и гладкомышечных клеток после 24-часовой инкубации с бактериальным липополисахаридом и интерфероном [46] также связывается с образованием значительных количеств эндогенного ONOО^–.

NO-индуцированный апоптоз играет важную роль в повреждении b-клеток поджелудочной железы, отвечающих за синтез инсулина, и в развитии инсулинзависимого диабета. Экзогенные и эндогенные NO-радикалы и пероксинитрит индуцируют апоптоз b-клеток, которые оказались чрезвычайно чувствительными к действию данных соединений [4]. Мишенью воздействия NO-радикалов в клетках является гуанилатциклаза, активация которой приводит к синтезу цГМФ. Экзогенные доноры NO^• индуцировали как гибель инсулинпродуцирующих клеток, так и продукцию цГМФ, при этом прямое воздействие аналогов цГМФ на клетки также вызывало апоптоз [47], что свидетельствовало об участии гуанилатциклазы в его индукции.

TNF-a

Как in vivo, так и in vitro многие цитокины могут индуцировать и ингибировать апоптоз. Наиболее полно изученным цитокином является фактор некроза опухолей (TNF), впервые выделенный из сыворотки больных с бактериальными инфекциями [1, 5]. B различных типах клеток стимуляция рецепторов TNF-a вызывает быстрое возрастание внутриклеточного уровня АМК. Так, посредством измерения образования метана в присутствии диметилсульфоксида было показано, что TNF-a индуцирует продукцию ОН- радикалов в трансформированных фибробластах мыши [48], при этом образование метана увеличилось с ростом цитотоксичности, определяемой по окраске метиленовым синим. Обработка TNF-a первичных культур человеческих фибробластов повышала продукцию О₂^•– и Н₂О₂ (по восстановлению нитросинего тетразолия или цитохрома С, а также окислению скополетина [49]).

Один из возможных механизмов образования АМК при действии TNF-a — нарушение функции митохондриальной цитохром-с-оксидазы, что проявляется в ингибировании конечного IV комплекса цепи переноса электронов с одновременным стимулированием активности сукцинатдегидрогеназы, переносящей электроны на Q, который,в свою очередь реагирует с О₂ с образованием O₂^•– [37]. Такой энергетический дисбаланс в митохондриях, приводящий к снижению синтеза АТФ, усилению генерации АМК и развитию окислительного стресса, вызывает радикал-индуцированное цитотоксическое нарушение мембран, повреждение ДНК и, как следствие, гибель клеток.

FAS-белки

Апоптоз может быть вызван стимуляцией FAS-белков (АРО-1, СD 95), экспрессируемых на лимфоцитах и других типах клеток и принадлежащих к тому же семейству трансмембранных белков, в которое входят рецепторы для TNF. Показано, что обработка анти- FAS-антителами моноцитов, экспрессирующих этот белок после их активации ИЛ-1 или TNF, приводила к возрастанию внутриклеточного уровня АМК (регистрируемых по флюоресценции продуктов окисления дихлорофлуоресцеина) и апоптозу, который ингибировали добавлением N-ацетилцистеина или восстановленного глутатиона [50]. Кроме того, было также установлено, что самого по себе взаимодействия специфических антител с FAS недостаточно для индукции апоптоза: если экспрессию FAS на клетках индуцировали липополисахаридами, то анти- FAS-антитела не вызывали роста АМК и апоптоза [51].

Чувствительность клеток к FAS-индуцированному саморазрушению также зависит от уровня внутриклеточных антиоксидантов. Исследование клеток мутагенного клона лейкозной Т-клеточной линии, устойчивых к FAS-индуцированному апоптозу, показало, что уровень в них глютатиона и активность g-глютамилцистеинсинтетазы (ключевого фермента синтеза глютатиона) были на 150% больше чем в клетках исходной линии, чувствительной к FAS-индуцированному апоптозу [52]. Участие АМК в FAS-индуцированной аутодеструкции подтверждается также защитным эффектом N-ацетилцистеина, хелатора ионов железа (дефероксамин) и применением спиновых ловушек свободных радикалов [50].

ЛНПо

Многие продукты радикал-зависимых окислительных реакций могут также индуцировать апоптоз. В развитии атеросклероза ключевую роль играют окисленные липопротеины низкой плотности (ЛНПо) захват которых моноцитами и макрофагами через скэвенджер-рецепторы приводит к образованию пенистых клеток и лежит в основе формирования атеросклеротической бляшки [53, 59]. С помощью электронной микроскопии и определения фрагментации ДНК (TUNEL-метод) по краям атеросклеротической бляшки выявляются макрофаги и гладкомышечные клетки, погибающие посредством апоптоза [54]. Окисление в присутствие ионов меди в ЛНП вызывали запрограммированную гибель человеческих моноцитов и макрофагов [55], гладкомышечных клеток [56], эндотелиоцитов [57], а также нейронов дорсального ганглия крыс [58]. Индуцированный ЛНПо апотоз гладкомышечных клеток усиливался цитокинами (TNF-a и интерфероном- ) [56]. Саморазрушение эндотелиоцитов человека, вызванное ЛНПо, представляет собой кальций зависимый процесс, который ингибируется хелаторами ионов кальция, блокаторами кальциевых каналов (нифедипин и др.) и ингибитором эндонуклеаз (аypин), трикарбоновой кислотой [57]. Возможно, что цитотоксический эффект ЛНПо опосредован NО- синтазой [53] или протеиназами, которые активируются, высвобождением ионов кальция [57]. Вместе с тем токсичность окисленных ЛНП в отношении эндотелиальных клеток из аорты быка ингибировалась донорами NO-радикалов [60].

УФО-, гамма- и лазерная радиация

Известно, что апоптоз является способом ограничения клеточной пролиферации. Так ультрафиолетовое (УФО), рентгеновское облучение или проведение лазерной фотодинамической терапии индуцирует образование АМК, что способствует развитию апоптоза [61, 62]. Преинкубация клеток HL-60 с каталазой (500 ЕД/мл) ингибировала их саморазрушение, вызванное УФО и токсическими эффектами лекарственных препаратов, в тоже время экзогенная СОД (400 Ед/мл) была эффективна только в отношении УФО-индуцированного апоптоза [7].

Механизм генерации АМК

Токсическое действие АМК проявляется при состояниях ОС, который сопровождается резкой интенсификацией свободно-радикальных процессов в тканях. Это является важнейшим патогенетическим звеном развития многих воспалительных процессов, радиационных поражений, сердечно-сосудистых, онкозаболеваний, химических и других интоксикаций. Механизм генерации АМК при многих патологических состояниях носит общий характер (рисунок). При этом причины, вызывающие интенсификацию свободно-радикальных процессов, могут быть разными, но изменения на молекулярном уровне носят однотипный характер, в тоже время процессы генерации АМК взаимосвязаны. Некоторые антиоксиданты в условиях ОС могут выступать в качестве прооксидантов. При состояниях ОС возрастает восстановительный потенциал клетки за счет субстратов, коферментов в восстановленном состоянии, что приводит к снижению рН в очагах ишемии тканей сердца и головного мозга. Это создает условия для повышения пула "активных форм" металлов переменной валентности. В условиях повышеной генерации АМК они могут участвовать в реакциях, связанных с генерацией радикальных продуктов. Так, в присутствии fe/cu и О₂ тиолы (rsh) являются источниками радикалов, rs^•, О₂^•–, Н₂О₂ и ОН^•, НАД(Ф)Н-радикалов НАД(Ф)^•, аскорбиновая кислота — семидегидраскорбат радикала [29, 45]. Повышение уровня АМК сопряжено с интенсификацией процессов окислительной деструкции липидов, белков, нуклеиновых кислот, углеводов. Именно интенсификация этих процессов является основной причиной цитотоксического поражения тканей.

Заключение

Токсические эффекты АМК, как правило, реализуются через каскад окислительных реакций, поэтому существенно зависят от соотношения продукции разных форм АМК, наличия в среде ионов металлов переменой валентности, присутствия антиоксидантов, а также от стадии апоптического процесса. Вместе с тем, вопрос участия АМК в процессе апоптоза нельзя считать окончательно разрешенным. Наиболее перспективным для будущих исследований представляется поиск фактов, прямо или косвенно указывающих на ведущую роль свободно-радикальных процессов в механизме запуска апоптоза. С этих позиций еще предстоит понять и объяснить различные варианты индуцируемого (активацией каспаз) окислительного стресса, а также АМК-зависимых мутаций генов.

Литература
1. Buttke T.M., Sadstrom P.A. Oxidative stress as a mediator of apoptosis // Immunol. Today. —1994. —15. —P. 7—14.
2. Stoian I., Oros A., Moldoveanu E. Apoptosis and free radicals // Biochem. and Mol. Med. —1996. —59. —P. 93—97.
3. de Bono D.P., Yang W.D. Exprosure to loul concentrations of hydrogen peroxide cayses delayed endotnelial cell death and inhibits proliferation of surviving cells // Atherosclerosis. —1995. —114. —P. 235—240.
4. Dimatteo M.A., Loweth A.C., Thomas S. Superoxide, nitric oxide, peroxynitrite and cytokine combinations all cause functional impairment and morpfological changes in rat islets of Langerhans and insulin secreting cell lines, but dictate cell death by different mechanisms // Apoptosis. —1997. —2. —P. 164—169. 5. Lin K.T., Xue J.Y., Sun F.F. Reactive oxygen species participate in peroxynitrite —induced apoptosis in HL —60 cells // Biochem. and Biophys. Res. Communs. —1997. —230. —P. 115—121.
6. Леоненко О.Б. Процеси вільнорадикального перекисного окислення ліпідів в механізмі дії пестицидів. Автореф. дис. … докт. біол. наук. —Київ, 1997. —45 с. 7. Morita A., Werfel T., Stege H. Evidence that singlet oxygens induced human T-helper cell apoptosis is the basic mechanism of ultraviolet A radiation phototherapy // J. Exptl. Med. —1997. —186. —P. 1763—1769.
8. Коршун М.М., Колесова Н.А. Ткаченко І.І., Литвиненко В.І. Закономірності вільнорадикального окислення та енергетичного обміну в життєвоважливих органах експериментальних тварин при тривалій поєднаній дії малих доз іонізуючої радіації та хімічних забруднювачів грунту // Совр. проблемы токсикол. —2001. —№1. —С. 32—38.
9. Gorman A., Mc Govan A., Cotter T.G. Role of peroxide and superoxide amion during tumour cell apoptosis // Febsletts. —1997.- 404. —P. 27—34.
10. Kehrer J.P. Cause-effect of oxidative stress and apoptosis // Teratology. —2000. —62. —P. 235—246.
11. Sandstrom P.A., Tobbey P.W. Lipid hidroperoxides induce apoptosis in T cell displaying a HIV-associated glutatione peroxidase deficiency // J. Biol. Chem. —1994. —269. —P. 798—804.
12. Carmody R.J., Cotter T.G. Signalling apoptosis a radical approach // Redox Rep. —2001. —6. —P. 77—90.
13. Girotti A.W. Lipid hydroperoxide generation, turnover and effector action in biological system // J. Lipid. Res. —1998. —39. —P. 1529—1542.
14. Лю Б.Н. Кислородно-перекисная концепция апоптоза и возможные варианты его механизма // Усп. совр. биологии. —2001. —Т. 121, №5. —С. 488—501.
15. Sorescu D., Somers M.J., Lassegne B. Electron spin reconance characterization of the NAD (P) H oxidase in vascular smooth muscle cells // Free Radic. Biol. Med. —2001. —30. —P. 1603—1612.
16. Brar S.S., Kennedy T.P., Whorton A.R. Requirement for reactive oxigen species in serum-induced and platelet-derived growth factor-induced growth of airway smooth muscle // J. Biol. Chem. —1999. —274. —P. 20017—20026.
17. Suh Y., Arnold R.S., Lasseque B. Cell transformation by the superoxide-generating oxidase. MOX-1 // Nature. —1999. —401. —P. 79—82.
18. Brown M.R., Miller F.J., Li W.G. Overexpression of human catalase inhibits proliferation and promotes apoptoses in muscular smooth muscle cells // Circ. Res. —1999. —85. —P. 524—533.
19. Moldavan L., Moldavan N.J., Sohn R.H. Redox changes of cultured endothelial cells and action dynamics // Circ. Res. —2000. —86. —P. 549—557.
20. Gamaley I.A., Klyubin I.V., Roles of reactive oxygen species: signaling and regulation of cellular function // Int. Rev. Cytol. —1999. —188. —P. 203—255.
21. Safa O., Hensley K., Smirnov M.D. Lipid oxidation enhances the function of activated proteinkinaseC // J. Biol. Chem. —2001. —276. —P. 1829—1836.
22. Kim B., Han M., Chung A.S. Effects of reactive oxygen species on proliferation of chinese hamster lung fibroblast (V 79) cells // Free Radic. Biol. Med. —2001. —30. —P. 686—698.
23. Sunderson M., Yu Z.X., Ferrans V.J. Requirement for generation of H O for platelet-derived growth factor signal transduction // Science. —1995. —270. —P. 296—299.
24. Bac Y. S., Kang S.W., Seo M.S. Epidermal growth factor (EGF)-induced generation of hydrogen // J. Bid. Chem. —1997. —272. —P. 217—221.
25. Thannical V.J., Fanburg B.L. Activation of an H O -generating NADH oxidase in human fibroblast by transforting growth factor —beta 1 // J. Biol. Chem. —1995. —270, №51. —P. 30334—30338.
26. Lo Y.Y., Cruz T.F. Involvement of reactive oxygen species in cytokine and growth factor induction of C-fos expression of chondrocytes // J. Biol. Chem. —1995. —270, №2. —P. 11727—11730.
27. Kang S.W., Shae H.Z., Seo M.S. Mammalian peroxiredoxin-isoforms can reduce hydrogen peroxide generated in response to growth factors and tumor necrosis factor-alpha // J. Biol. Chem. —1998. —273. —P. 6297—6302.
28. Rothstein J.D., Bristol L.A., Hosler B. Chronic inhibition of superoxide dismutase produces apoptotic death of spinal nevrons // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. —1994. —91, 6. —P. 4155-4159.
29. Troy C.M., Shelansky M.L. Down-regulation of copper/zinc superoxide dismutase causes apoptotic death in PC 12 neuronal cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. —1994. —№14. —P. 6384—6387.
30. Suzuki Y.I., Forman H.J., Sevanian A. Oxidants as stimulators of signal transduction // Free Radic. Biol. Med. —1997. —22. —P. 269—
285. 31. Roveri A., Coassin M., Maiorino M. Effect of hydrogen peroxide on calcium homeostasis in smooth muscle cells // Arch. Biochem. Biophys. —1992. —297. —P. 265—270.
32. Maki A., Berezesky I.K., Fargnoli J. Role of [Ca ] in induction of c-fos, c-jin, and c-misc m RNA in the rat PTF after oxidative stress // FASEB J. —1992. —6. —P. 919—924.
33. Reeves J.P., Bailey C.A., Hale C.C. Redox modification of sodium-calcium exchange activity in cardiac sarcolemmal vesicles // J. Biol. Chem. —1986. —261, №11. —P. 4948—4955.
34. Richter C., Free B. Ca release from mitochondria induced by prooxidants // Free Radic. Biol. Med. —1988. —4. —P. 365—375.
35. Gopalakrishna R., Jaken S. Protein kinase C signaling and oxidative stress // Free Radic. Biol. Med. —2000. —28. —P. 1349—1361.
36. Rincon V., Flavell R.A., Davis R.A. The JNK and P 38 MAP kinase signaling pathways in cell-mediated immune responses // Free Radic. Biol. Med. —2000. —28. —P. 1328—1337.
37. Скулачев В.П. Феноптоз: запрограммированная смерть организма // Биохимия. —1999. —Т. 64, №12. —С. 1679—1688.
38. Zoratti M., Szabo I. The mitochondrial permeability transition // Biochim. Biophys. Acta. —1995. —1241, №2. —P. 139—176.
39. Fulda S., Susin S.A. Kroemer G. Molecular aspects of apoptosis induced by anticancer drugs in neuroblastoma cells // Cancer Res. —1998. —58. —P. 4453—4460.
40. Estevez A.G., Spear N., Mannuel S.M. Nitric oxide and superoxide contribute to motor neuron apoptosis induced by trophic factor deprivation // J. Neurosci. —1998. —18. —P. 923—931.
41. Xie Y.W., Wolin M.A. Role of nitric oxide and its interaction with superoxide in the suppression of cardiac muscle mitochondrial resperation. Involvement in response to hypoxia/reoxygenation // Circulation. —1996. —94. —P. 2580—2586.
42. Брэюне Б., Сандай К., Киетен А. Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути // Биохимия. —1998. —Т. 63, Вып. 7. —С. 966—975.
43. Maulik N., Yoshida T., Das D.K., Oxidative stress developed during the reperfusion of ischemic myocardium induces apoptosis // Free Radic. Biol. Med. —1998. —24. —P. 869—875.
44. Залесский В.Н. Гавриленко Т.Н. Фильченков А.А. Апоптоз при ишемии — реперфузии миокарда // Врач. дело. —2002. —№1. —С. 8—15.
45. Radi R., Beckman J.S., Bush K.M. Peroxynitrite-induced membrane lipid peroxidation: the cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide // Arch. Biochem. Biophys. —1991. —288, №2. —P. 481—487.
46. O`Connor M., Salzmann A.L., Szabo C. Role of peroxynitrite in the protein oxidation and apoptotic DNA fragmentation in vascular smooth muscle cells stimulated with bacterial interferon-gamma // Shock. —1997. —8. —P. 439—446.
47. Loweth A.C., Williams G.T., Scarpello J.H. Evidence for the involvement of GMP and protein kinase G in nitric oxide-induced apoptosis in the pancreatic B-cell line, HIT-T15 // Febs Letts. —1997. —400. —P. 285—288.
48. Yamauchi N., Kuriyama H., Watanabe H. Intracellulare hydroxide radical production induced by recombinant human tumor necrosis factor and its implication in the killing of tumor cells in vitro // Cancer Res. —1989. —49. —P. 1671—1675.
49. Meier B., Radeke H.H., Selle S. Human fibroblasts release reactive oxygen species in response to interleukin-1 or tumor necrosis factor-alpha // Biochem. J. —1989. —263, №2. —P. 539—545.
50. Um H.D., Orenstein J.M., Wahl S.M. Fas mediated apoptosis in human monocytes by a reactive oxygen intermediate dependent pathway // J. Immunol. —1996. —156, №9. —P. 3469—3477.
51. Larrick J.M., Wryght S.C. Cytotoxic mechanism of tumor necrosis factor-alpha // FASEB. J. —1990. —4. —P. 3215—3223.
52. Kohno T., Yamada Y., Hata T. Relation of oxidative stress and glutatione to CD 95 (FAS/APO-1)-mediated apoptosis of adult T cell leukemia cells // J. Immunol. —1996. —156, №12. —P. 4722—4728.
53. Зенков Н.К., Менщикова Е.Б. Окислительная модификация липопротеинов низкой плотности // Усп. совр. биологии. —1996. -Т. 116, Вып. 6. —С. 799—748.
54. Hegyi L., Skepper J.N., Cary N.R. Foam cell apoptosis and the development of the lipid core of human atherosclerosis // J. Pathol. —1996. —180. —P. 423—429.
55. Bjorkerud B. Contrary effects of lighting and storgly oxidized LDL with potent promotion of growth versus apoptosis on arterial smooth muscle cells // Arterioscl. Thrombosis and Vasc. Biol. —1996. —16. —P. 416—424.
56. Jovinge S., Crisby M., Thyberg J. DNA fragmentation and ultrastructural changes of degenerating cells in atherosclerotic lesions // Arterioscl. Thrombosis and Vasc. Biol. —1997. -17. —P. 2225—2231.
57. Escargueilbane I., Meilhac O., Pieraggi M.T. Oxidized LIOLS induced massive apoptpsis of cultured human endothelial cells throught a calcium-dependent pathway prevention by aurintricalboxylic acid // Arterioscl. Thromb. and Vasc. Biol. —1997. —17. —P. 331—339.
58. Papassotiroponlos A., Ludwig M. Induction of apoptosis and secondary necrosis in ganglion cell cultures by oxidized low density lipoprotein // Neurosci Lett. —1996. —209. —P. 33—36.
59. Стойка Р.С., Фильченков А.А., Залесский В.Н. ТФР-бета1: проатерогенный или антиатерогенный цитокин? // Цитокины и воспаления. —2002. —Т. 1, №1. —С. 14—19.
60. Strick A.T., Hogg N., Thomas J.P. Nitric oxide donor compounds inhibit the toxicity of oxidized low-density lipoprotein to endothelian cells // FEBS Lett. —1995. —361. —P. 291—294.
61. Zalessky V.N., Bass T. Yu., Egorova G.D. Argon laser photodynamic therapy of solid Erlich carcinoma sensitized with of some porhyrin compounds // Lasers in Med. Sci. —1989. —4. —P. 265—268.
62. Dougherty T.J., Marcus S.L. Photodymic therapy // Europ. J. Cancer. —1992. —28. —P. 1734—1792.

| Зміст |